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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
M13mp18DNA
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10μg

服务流程:
1)M13mp18DNA10μg规格客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
储存事项:
A. M13mp18DNA10μg规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. M13mp18DNA10μg规格组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
cDNA 第一链合成试剂盒10 次 非变性蛋白分子量标准25mg
cDNA 第一链合成试剂盒50 次 二氯异香豆素溶液,10mg/mL5mL
AMV cDNA 第一链合成试剂盒30 次 多粘菌素 B 硫酸盐5mL
miRNA cDNA 第一链合成试剂盒25 次 动植物总蛋白微量提取试剂盒50 次
miRNA 荧光定量检测试剂盒25 次 动植物膜蛋白微量制备试剂盒50 次
非酶多糖清除剂 (RNA 专用 )10mL 重组蛋白 A1mg
TRIzol 伴侣50 次 重组蛋白 A/G1mg
重蒸酚100mL 重蒸酚100mL
水饱和酚100mL 终点显色法内毒素定量试剂盒32 次
Tris 饱和酚100mL 中提柱式 BAC DNAout5次
柱式 DNA 胶回收试剂盒100 次 硫酸卡那霉素干粉1g
胶回收及 PCR 片段纯化两用试剂盒50 次 膦酰二肽溶液,10mg/mL10mL
胶回收及 PCR 片段纯化两用试剂盒100 次 磷酸化蛋白富集试剂盒10 次
一管式 DNA 胶回收试剂盒30 次 磷酸化蛋白纯化试剂盒50 次
一管式 DNA 胶回收试剂盒100 次 磷酸蛋白染色试剂盒10 次
阿舒多囊霉 平盖灵芝(树舌)
解藻弧菌(溶藻弧菌) 人苍白杆菌
刺孢小单孢菌绛红变种 镰孢 模式菌株。
日本根霉 玖红穗状霉 分离源:金针菇培养料。
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae 改良马丁培养基40ml
大肠杆菌 Escherichia coli 大肠埃希菌ATCC8099冻干粉
丝球毛霉 粉红寄生菌
平盖灵芝(树舌) 侧耳
谢瓦曲霉 黄直丝链霉菌
鼠伤寒沙门菌冻干粉 苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis
M13mp18DNA10μg规格改良马丁琼脂培养基90mm 粪肠球菌ATCC51299冻干粉
指状青霉 玫瑰褐链霉菌
苏云金芽胞杆菌托马诺夫亚种 Bacillus thuringiensis subsp. toumanoffii 青枯假单胞菌
赭曲霉 白僵菌
孔雀石绿链霉菌 短裙竹荪东北变种
实验步骤:
(1) M13mp18DNA10μg规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验kaoyanbaihe M13mp18的全基因图谱在哪里才能查到呢,我只查到了多克隆位点的序列,另外需要它的全基因图谱。大家帮帮忙啊 baby_susan 你找的是这个网址吗http://www.fermentas.com/en/support/technical-reference/phage-plasmid-dna/m13mp18-m13mp19 woxingwosu http
相关专题 那些实验室常用的克隆载体 pUC18 和 pUC19质粒图谱 pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ,是最常用的质粒载体,其结构组成紧凑,几乎不含多余的 DNA 片段,GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来,其中 lacZ (MSC)来自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱 。 这两个质粒的结构几乎是完全一样的,只是多克隆位点的排列方向相反。这些质粒缺乏控制拷贝数的 rop 基因
核酸、核苷酸的基本换算 1.核酸的换算: (1)摩尔数与质量: 1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol 1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol 1 μg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol 1 μg SV40 DNA (5,243bp) = 0.29 pmol 1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmol 1 μg M13mp18/19 DNA (7.250bp
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