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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 英文名:
超快核酸转膜试剂盒
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5次

服务流程:
1)超快核酸转膜试剂盒5次品牌客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
储存事项:
A. 超快核酸转膜试剂盒5次品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 超快核酸转膜试剂盒5次品牌组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
替加环素22
替加环素(标准品)22
替米考星108050-54-0质量规格:干品纯度≥90.0%,干品含量≥85.0%,USP34
替米考星(标准品)108050-54-0质量规格:含量测定
马来酸噻吗洛尔26921-17-5质量规格:>99%,USP
异槲皮苷(标准品)Isoquercitrin质量规格:HPLC≥98%,标准品
异茴芹内酯Isopimpinellin质量规格:HPLC≥98%,标准品
异类叶升麻苷;异毛蕊花糖苷(标准品)Isoacteoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
异绿原酸A(标准品)Isochlorogenic acid A质量规格:HPLC≥98%,标准品
异绿原酸B(标准品)Isochlorogenic acid B质量规格:HPLC≥98%,标准品
盐酸洛哌丁胺(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Loperamide HCl
酮咯酸氨丁三醇质量规格:>98.5%,USP,BRKetorolac Tromethamine
酮咯酸氨丁三醇(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Ketorolac Tromethamine
兰索拉唑质量规格:干品含量>98%,USP32Lansoprazole
兰索拉唑(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Lansoprazole
阿舒多囊霉 平盖灵芝(树舌)
解藻弧菌(溶藻弧菌) 人苍白杆菌
刺孢小单孢菌绛红变种 镰孢 模式菌株。
日本根霉 玖红穗状霉 分离源:金针菇培养料。
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae 改良马丁培养基40ml
产气肠杆菌 硝基还原假单胞菌
菅囊酵母 灰葡萄孢
健强地霉 粪肠球菌冻干粉
粪肠球菌 阿舒多囊霉
华美链霉菌 解藻弧菌(溶藻弧菌)
超快核酸转膜试剂盒5次品牌地霉属 雪白根霉
戊糖乳杆菌 丝球毛霉
光滑念珠菌KTCC0001冻干粉 巧克力微杆菌
头状丝孢酵母 卷枝毛霉
抗辐射链霉菌 沙保罗琼脂平板70mm
实验步骤:
(1) 超快核酸转膜试剂盒5次品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验musculus),如下图所示:然后我们把这个序列贴到 SOSUI 里面:然后接得到这这些结果:从这个结果我们知道这个蛋白跨膜 7 次,在胞内有两个较大的亚基,因此我们选择裂解液至少也要用 RIPA 而不能用 NP40,否则不能把这个蛋白从细胞膜里面拽出来,或者需要用专门的膜蛋白提取试剂盒来操作。选抗体的时候需要注意一下它的免疫原氨基酸序列是否是胞内的氨基酸序列,因为这样抗体识别的效果是最佳的。然后我们要计算一下 PI,可以用这个工具:输入氨基酸序列之后就得到了分子量和等电点 PI:这个信息对于我们选择哪种
下 12000rpm 离心 15 min。收集蛋白上清,取少许裂解液用于后续检测各蛋白表达情况。剩余的裂解液加入 Anti-Cdc37,4℃ 缓慢摇晃孵育过夜。用适量裂解缓冲液预处理 ProteinA+G,20uL/管加入各抗体孵育过夜的细胞裂解液中,4℃ 缓慢摇晃孵育 2~4 h。免疫沉淀反应后,4℃,3000rpm,3 min,小心吸取上清,琼脂糖珠用 1 mL 裂解液冲洗 3-4 次,最后加入 15uL 2*SDS 上样缓冲液,100℃,5 min。Laemmli-SDS-PAGE电泳:电泳时根据情况
真空转移 2. 固相支持物的种类及选择: 硝酸纤维素膜:非共价结合,易脆,易丢失DNA , 尼龙膜(带正电荷的)高强度,不易破损,具有较大的DNA 结合容量,它能够吸附变性DNA ,核酸以共价结合方式不可逆的结合在尼龙膜上。尼龙膜两边均有吸附DNA 的功能,无论用哪边均可以经久耐用,可反复利用 10 次以上( 10-20 次),经毛细管(毛细吸附)作用,把DNA 从凝胶上转到膜上。DNA 转到膜上是复制胶上的带型,在 80-100 ℃真空干燥 2-4 hrs
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