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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
24
- 英文名:
冷冻型血液 RNA 保存液
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100mL
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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冷冻型血液 RNA 保存液100mL费用详细介绍:
操作步骤:
1. 冷冻型血液 RNA 保存液100mL费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是冷冻型血液 RNA 保存液100mL费用的相关产品:
4× 核酸液相杂交液10mL 核酸清除剂1.5mL
DNA 稀释液10mL 核苷酸类似物法易错 PCR 试剂盒15 次
DNA 溶解液10mL 海藻糖溶液,1.5M,PCR 级1.5mL
微量双链 DNA 定量试剂盒1mL 海量 PCR 片段纯化试剂盒5次
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柱式血液 RNAout50 次 柱式植物 RNAout 2.050 次
大提柱式血液 RNAout5次 柱式植物 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
液体 RNAout50 次 柱式植物 mtDNAout,测序级10 次
液体 RNAout250 次 柱式植物 DNAout50 次
柱式血清血浆 RNAout50 次 柱式真菌 RNAout50 次
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线状 DNA 清除剂30 次 溴化乙锭清除剂100 次
细菌 DNAout50 次 溴化乙锭干粉 (EB)1g
细菌 DNAout250 次 星形细胞生长因子5mL
柱式细菌 DNAout50 次 星形胶质细胞生长因子5mL
改良马丁培养基颗粒 英文名称; Martin Medium, Modified 规格; 300ml/袋*10
沙氏葡萄糖液体培养基颗粒 英文名称; Sabouraud’s Glucose Broth Medium 规格; 300ml/袋*10
沙氏葡萄糖琼脂培养基颗粒 英文名称; Sabouraud’s Glucose Agar Medium 规格; 300ml/袋*10
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)颗粒 英文名称; Lauryl Sulfate Tryptose Broth 规格; 300ml/袋*10
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)颗粒 英文名称; Brilliant Green Lactose Bile Broth 规格; 300ml/袋*10
志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素 Shigella Broth 250g
尿素琼脂(PH7.2) Urease Agar Base 250g
新生霉素(125ug/支) 125ug/支*5
半固体营养琼脂 Semisolid Nutrient Agar 250g
麦康凯琼脂(MAC) MaConkey Agar 250g
冷冻型血液 RNA 保存液100mL费用营养肉汤管 用于细菌的培养,转种,复壮,增菌用于细菌的培养,转种,复壮,增菌
改良马丁培养基管 用于霉菌酵母菌的检验用于霉菌酵母菌的检验
菌种保存和标本运送培养基
瓷珠菌种保存管(50支) 用于菌种保存(瓷珠法)瓷珠菌种保存管由冷冻管、瓷珠和冷冻保存液组成,主要用于菌种保存、复苏和运输。相对于传统的菌种保藏方法具有明显的优势:1、操作简单方便:挑取细菌新鲜纯培养物,接入菌种保存管。2、菌种保存快速:内含天然的多孔瓷珠,有利于细菌的吸附及保存。冷冻保存液使菌株免受溶液和冰晶影响。混匀后,吸出冷冻保存液。3、包装物体积小:1.8ml冷冻管。4、菌种保存时间长:特殊材料制成的冷冻管,密封性能及耐低温性能极好。2-8℃可保存6个月;-20℃可保存12个月;-80℃可保存24个月。
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文献和实验的纯度。 5.干燥 从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸,放在8cm 表面皿上,置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA 制品称重。 6.含量测定 称取一定量干燥后的RNA 产品配制成浓度为10~50μg/mL 的溶液,在751 型 分光光度计 上测定其260nm 处的光密度值,按下式计算RNA 含量: 式中:OD260nm 为260nm 处的光密度值;L 为比色杯的光径(cm
而破坏 mRNA 活性。 2.但DEPC能与胺和巯基反应因而含 Tris 和 DTT 的试剂不能用 DEPC 处理。 四、实验步骤 1. 取 50~100mg 的组织加入1 ml Trizol 试剂,用匀浆器打匀( Trizol 先放于冰上)。 2. 将匀浆室温放置 5 min。 3. 加入 200 μl 氯仿剧烈震荡混匀 30s,冰上静置 3 min。 4. 12000 rpm,4℃ 离心 15 min。 5. 将上清液小心转移到新的 1.5 ml离心管中(取 400
,那么在药品称量、调 pH 值等过程中 Tris 缓冲液会造到 RNase 的再次污染,所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是 RNase 并不顽固,高压灭菌可以去除其大量活性。 下面的实验照片很清楚的显示了高压灭菌的效果。实验很简单,将不同含量的 RNase 用高压灭菌处理,然后与未高压灭菌处理的 RNase 一起来降解 RNA(37 度 1 小时),结果表明,当 RNase 的污染量小于 100 ng/ml 时,高压灭菌可以去除其活性。 这张照片还说明了一个问题,当你的 RNA
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