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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
环丙沙星残留ELISA检测试剂盒(抗生素残留)
- 库存:
44
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 应用:
检测法
- 检测方法:
ELISA
- 检测范围:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 规格:
96T
产品介绍:
产品名称:环丙沙星残留ELISA检测试剂盒(抗生素残留)96T使用说明书
规格:96T
测试方法:ELISA
实验原理环丙沙星(Ciprofloxacin,CPFX)属于化学合成的氟喹诺酮类广谱高效抗菌药物,广泛应用于养殖、临床等各个领域。COFX作为人畜公用药,药物残留危害极大。
注意事项:
①环丙沙星残留ELISA检测试剂盒(抗生素残留)96T使用说明书加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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操作流程:
1. 环丙沙星残留ELISA检测试剂盒(抗生素残留)96T使用说明书 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验或存放不当:质粒提取试剂盒成分复杂且保存条件不同,有的试剂还容易出现浑浊。在使用之前需要检查试剂是否保存得当,如果出现浑浊,可参考试剂盒说明书,进行 37℃ 温浴至溶液澄清,再冷却至室温使用。 ⑦洗脱液体积不合适:洗脱液使用体积过大会导致提取浓度偏低,过小会导致洗脱不充分,产量过低。建议参考试剂盒说明书来确定洗脱体积,如果洗脱浓度偏低,可以重复洗脱一次; ⑧洗脱液未添加到硅胶膜中心:可能会导致洗脱液覆盖不完全,导致洗脱效率降低。此外洗脱液可以使用碱性洗脱缓冲液或者无核酸酶的水,避免使用 PH<
组 DNA 的污染? (1)菌体裂解和中和过程中,剧烈混合造成基因组 DNA 断裂所致。解决方法:温和地进行菌体的裂解和中和。 (2)加 Solution II 时操作时间过长,造成基因组 DNA 断裂所致。解决方法:将裂解步骤控制在5分钟内完成。 (3)细菌的质量差(反复冻融的细菌,陈旧的细菌,培养条件不合适的细菌等)中有许多断裂或降解而游离的基因组 DNA,使用生长良好的新鲜细菌。 6.加样时 DNA 飘出加样孔外? 忽略或省略了高速离心以甩干残留的 Rinse B 的操作步骤。解决方法:按说明书
上推荐的洗涤次数清洗,随意改变洗涤的次数会影响实验的精确性。 贮液瓶 为避免污染,不同的试剂使用不同的贮液瓶。一些试剂或样本很容易被污染(比如唾液、氧化剂等),请参考说明书操作。必要时候采取一些预防措施保护溶液。另外,要保证盛放试剂或洗液的加样槽的清洁度,避免造成污染。 封板覆膜 使用过的封板覆膜可能含有上一步实验残留的试剂,如果重复使用会造成孔板污染,从而导致精确性低。建议每一次孵育使用新的封板覆膜。
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