- ¥300
- 复百澳
- FBE004
- 苏州
- 2025年12月08日
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- 详细信息
- 技术资料
- 英文名：
Puromycin
- 保质期：
1年
- 供应商：
复百澳
- 保存条件：
4°C
- 规格：
1ml
Puromycin产品使用说明书
1、产品信息：
产品名称：Puromycin（嘌呤霉素）
货 号：FEB004
存储浓度：
产品规格：
化学式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.44
外观（性状）：白色或白中带有黄色的粉末
2、运输和储存条件
本产品在低温下快递寄送。收到后请于4℃保存，有效期1年。
3、作用机制：
Puromycin（嘌呤霉素）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。作用机制在于嘌呤霉素是具有与tRNA分子末端类似的结构, 能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合，并掺入到生长的肽链中。虽然嘌呤霉素能够同A位点结合，但是不能参与随后的任何反应，因而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶（PAC），赋予机体对嘌呤霉素产生抗性，这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
常用于应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
4、使用方法：
1、本品是无菌的Puromycin溶液，可直接用培养基稀释使用，或先用溶剂水或PBS溶液稀释到低浓度备用。
2、常用浓度：Puromycin用来筛选稳转株的工作浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度及细胞所处细胞周期位置等有关，对于大多数哺乳动物细胞，推荐使用浓度为1-10 μg/mL，最佳浓度需要通过建立杀灭曲线（kill curve）来确定。
3、杀灭曲线确定最佳杀死浓度：
对感染或转染有Puromycin药物耐受的细胞，更换为含相应浓度的Puromycin的培养基，继续培养；
每隔2-3天换液，更新含有Puromycin药物的筛选培养基继续培养，直至筛选出能够表达Puromycin抗性表型的活细胞；更换为常规培养液。
每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
5、注意事项：
更多技术资料您可关注复百澳生物微信公众号，或访问复百澳生物官网：http://www.fubio.cn/获取。
1、产品信息：
产品名称：Puromycin（嘌呤霉素）
货 号：FEB004
存储浓度：
产品规格：
化学式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.44
外观（性状）：白色或白中带有黄色的粉末
2、运输和储存条件
本产品在低温下快递寄送。收到后请于4℃保存，有效期1年。
3、作用机制：
Puromycin（嘌呤霉素）是由白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。作用机制在于嘌呤霉素是具有与tRNA分子末端类似的结构, 能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合，并掺入到生长的肽链中。虽然嘌呤霉素能够同A位点结合，但是不能参与随后的任何反应，因而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶（PAC），赋予机体对嘌呤霉素产生抗性，这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
常用于应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。
4、使用方法：
1、本品是无菌的Puromycin溶液，可直接用培养基稀释使用，或先用溶剂水或PBS溶液稀释到低浓度备用。
2、常用浓度：Puromycin用来筛选稳转株的工作浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度及细胞所处细胞周期位置等有关，对于大多数哺乳动物细胞，推荐使用浓度为1-10 μg/mL，最佳浓度需要通过建立杀灭曲线（kill curve）来确定。
3、杀灭曲线确定最佳杀死浓度：
- 第一天：将未转染的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃细胞孵育过夜；
- 第二天：根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度（至少选择5个浓度），每孔加入含不同浓度Puromycin的新鲜培养基；之后37℃孵育细胞；根据细胞的生长状态，约2-3天更换新鲜的筛选培养基；
- 每日监测细胞，观察存活细胞率，从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物最低浓度。
对感染或转染有Puromycin药物耐受的细胞，更换为含相应浓度的Puromycin的培养基，继续培养；
每隔2-3天换液，更新含有Puromycin药物的筛选培养基继续培养，直至筛选出能够表达Puromycin抗性表型的活细胞；更换为常规培养液。
每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
5、注意事项：
- 本产品仅用于研究和实验室用途，不适用于药物、家庭或其他用途；
- 本品为有毒化合物，避免与皮肤和眼睛接触，请小心操作；
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
更多技术资料您可关注复百澳生物微信公众号，或访问复百澳生物官网：http://www.fubio.cn/获取。
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