- ¥600
- Fubio
- MCFB002
- 2026年02月05日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
50 rxns
- 产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 产品规格 | 储存条件 |
| MycoplasmaFree支原体检测试剂盒 | FBMC002 | 10 rxns | -20 ℃ |
| MycoplasmaFree支原体检测试剂盒 | FBMC003 | 20 rxns | -20 ℃ |
| MycoplasmaFree支原体检测试剂盒 | FBMC004 | 50 rxns | -20 ℃ |
- 产品描述
研究表明，至少二十多种支原体能污染细胞，其中最常见的有：口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、发酵支原体、人型支原体、唾液支原体、肺支原体等。培养细胞的支原体污染率在4%-92%不等，其污染来源包括工作环境、操作者本身（一些支原体是人体的正常菌群）、培养基、血清、细胞交叉污染、实验器材和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
Fubio支原体检测试剂盒主要采用PCR方法对各种生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。本试剂盒综合了几个优势：灵敏、特异、快速并且可以用直接用细胞培养上清液检测。本制品通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体，所用引物为根据支原体16S rRNA序列保守区域设计，只特异性扩增支原体DNA，检出灵敏度与特异性均较高。PCR扩增及电泳分析只需数个小时，操作方便简单。
本试剂盒可检测所用的莱氏无胆甾原体、支原体、螺原体等120余种亚种。
- 产品组分
| 组分名称 | 组分说明 | 规格 |
| Reaction Mix | 酶、引物混合物 | 100μl/200μl/500μl |
| Positive control | 阳性对照 | 30μl /60μl/150μl |
| Negative control | 阴性对照 | 30μl /60μl/150μl |
| Nuclease-Free H2O | 无核酸水 | 500μl/1 ml/2.5ml |
- 运输与储存
- 保质期
- 操作步骤
(1)将待检细胞换成无抗生素的完全培养基，至少培养3天以上且融合度达70%-90%。
(2)收集1ml细胞上清液， 1500 rpm离心5min , 取离心后的上,900µL转移到新EP管中再从900μL中吸取100μL留存备用。
（3）将步骤（2）中900μl再次使用12000rpm离心10min，弃去上清，用50ul Nuclease-Free H2O重悬。
（4）将步骤（3）中重悬样品用95'C:沸水浴中煮5min，用于支原体检测。
2.PCR体系配制
(1)按照下面PCR体系配置PCR预混体系(25µ1/反应）：
| 体系组分 | 体积（每反应） |
| Reaction Mix | 10 μl |
| 样品/ control | 3 μl |
| 超纯水 | 12 μl |
| 25μl |
(2) 加完所有待检样品后，振荡器上混匀，简短离心后，进行PCR扩增，反应程序如下：
| 温度 | 94℃ | 94℃ | 60℃ | 72℃ | 72℃ | 4℃ |
| 时间 | 5 min | 30 S | 30 S | 30 S | 10 min | ∞ |
| 循环数 | 1 | 35 | 1 | 1 | ||
3.PCR 产物的电泳检测
(1) 配置1%的琼脂糖凝胶，稍冷后加入核酸染料 , 注入凝胶模中，冷却凝固后，即可用于电泳。
(2) 在每管PCR产物中加入loading Buffer , 取8-10µL进行上样，Marker样5-10µL。
(待) 电泳：130V电泳30min (根据电泳仪情况，适当调整时间）。
(3) 电泳结束后取出凝胶千成像仪上抇照，并保存。
4. 结果判断
产物大小在370bp左右。
- 注意事项
2. 实验时，试剂盒中的每种试剂在使用前应充分融化，并上下颠倒多次以充分混匀，请勿激烈振荡。
3. 反应管中加好所有的试剂后，应尽快上PCR仪进行扩增，以免形成过多的二聚体。
5结果异常时，建议复检。
6结果为弱阳性时，建议将100μL留存上清继续培养3-4天，再次检测。
本产品仅供科研用途！
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- 内容
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文献和实验时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位：酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下，在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育，酶促反应开始进行，经过一定时间后，用终止液终止反应，通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量，除以时间即可
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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