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多重基因表达定量

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  • 重复性好,灵敏度高
  • 北京海淀区
  • 2025年07月14日
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      多重基因表达定量

    • 提供商

      毅新兴业(北京)科技有限公司

    1.有效的避免了PCR扩增效率的不同
    2.不受限于荧光素标记,重复性好,灵敏度高
    3.可以同时实现基因组中多个目的基因的定量分析

    技术特点


    常规的基因定量方法使用荧光定量PCR,由于PCR的扩增效率不一致,所以需要3个甚至更多的平行样本来消除差,MassARRAY平台的基因定量分析方法,引物竞争性PCR的方法,内标竞争子和待测模板在同一个反应体系中进行PCR反应,有效的避免了PCR扩增效率的不同。

    和常规的荧光定量技术相比,质谱检测不受限于荧光素标记,重复性好,灵敏度高,可以同时实现基因组中多个CNV和目的基因的定量分析。
      
    技术路线

    人工合成一个与待测目的基因特异性序列只有一个碱基差异的竞争子片段,将该竞争子片段连接近载体中,定量分析时该载体和基因组DNA同时作为模板进行PCR扩增,最后通过检测这两个不同扩增子的含量实现基因定量分析。

    参考文献


    [1] George H. Perry, Fengtang Yang, Tomas Marques-Bonet, et al. Copy number variation and evolution in humans and chimpanzees. Genome Res. 2008 18: 1698-1710

    [2] Richard Redon, Shumpei Ishikawa, Karen R. Fitch, et al. Global variation in copy number in the human genome. Nature.2006 November 23; 444(7118): 444–454.

    [3] Mamtani, M; Anaya, JM; He, W, et al.Association of copy number variation in the FCGR3B gene with risk of autoimmune diseases. GENES AND IMMUNITY.2010 Vol.11: 155-160

    [4] Asare, Adam L.; Kolchinsky, Svetlana A.; Gao, Zhong, et al.Differential gene expression profiles are dependent upon method of peripheral blood collection and RNA isolation. BMC Genomics 2008, 9:474

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