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- 百奥莱博
- QN2080-NQT
- 北京
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
196
- 英文名：
One-Step RT-PCR Kit
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
50T|200T
特别提示：包括一步法RT-PCR试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：一步法RT-PCR试剂盒
英文名称：One-Step RT-PCR Kit
产品货号：QN2080
产品规格：50T|200T
本品是一步法One-Step RT-PCR反应的专用试剂，反应过程在同一管内连续进行，避免开管，能有效防止污染。本品含有高温反转录酶（RNase H-）和新型热启动酶，采用优化配方的专用Buffer，具有更高的反转录和PCR扩增效率，适合于低浓度RNA模板的高灵敏度扩增。
本制品首先采用反转录酶以RNA为模板合成cDNA，然后再以合成的cDNA为模板，经过PCR扩增反应的热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复，在短时间内扩增得到大量DNA片段，扩增得到的目的产物3"末端含有一个A碱基，可直接用于T/A克隆。
产品内容：
25×One Step RTase mix
5×One Step RT Mix Buffer
技术说明：
1、该体系常用50℃进行反转录反应，可以在45℃~60℃范围内进行反转录温度优化；根据反应特征不同，可以在10～30分钟内对反转录时间进行优化；
2、该体系所用的反转录酶是在MMLV基础上进行了基因改造，去除了RNaseH活性，使其具有更高的温度耐受性和反转录温度，对RNA复杂结构模板具有更高的反转录效率；
3、该体系具有更好的体系稳定性和适用性，非常适合于病毒、组织等样本提取RNA复杂模板的检测。
除了一步法RT-PCR试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
YT378 2×PCR Master Mix（含Taq酶，buffer，dNTP） 400次
YT382 PCR Master Mix (含蓝色电泳染料) 400次|2000次|10000次
YT397 cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-) 20次|100次
WE0114 2×BaHF MasterMix(含染料) 5ml
ALH191 荧光定量反转录PCR试剂盒(两步法) 50μl×25次|50μl×50次
RFT095 2×Taq PCR MasterMix 500μl|5×500μl
RFT106 随机六聚体引物 100μl
JN0023 热启动Taq DNA聚合酶 250U
JN0057 极耐热单链DNA结合蛋白 50μg
JN0063 10mM dNTP溶液 250μl×5
QN0958 通用引物 27F 250μl(10uM)|1ml
QN0964 4×dNTPs(100mM) 4×100μl|4×400μl|4×1ml
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文献和实验请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分？
各位老师： 您们好！偶欲做几个基因的RT-PCR实验。偶先用传统的半定量两步法RT-PCR试剂盒(TaKaRa DRR019A)扩增了几个基因，并用该试剂盒反转录了不少cDNA。但还有2个基因偶打算用real time PCR法来扩增。拟采用TaKaRa DRR041S试剂盒。但是TaKaRa DRR041S试剂盒说明书上写的反转录步骤是使用另外一个单独的RT Reagents (TaKaRa DRR033A)，得到cDNA再用TaKaRa DRR041S试剂盒扩增。但是仅一个RT
1. 原理 RT—PCR 是一种将 cDNA 合成与 PCR 技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法，主要用于对表达信息进行检测或定量分析, 还可以用来检测基因表达差异而不必构建 cDNA 文库克隆 cDNA。 RT-PCR 的模板可以为总 RNA 或 poly(A) 选择性 RNA 。逆转录反应可以使用逆转录酶，以随机引物、oligo(dT) 或基因特异性的引物（GSP）起始。 在实际应用中，RT—PCR 又常常分为一步法 RT—PCR 和两步法 RT—PCR。 2. 特点 一步法
中，逆转录酶将 RNA 转化为 cDNA，然后通过 PCR 反应扩增 cDNA，为下游实验提供研究模板，因而逆转录酶是实验成功的关键步骤之一（如下图）。选定的逆转录酶应对所有样本均具有最高效率，即便是难转录 RNA 样本，如降解、抑制剂残留或具有高度二级结构的 RNA 样本。 图. 逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）。RT =逆转录，RTase =逆转录酶 常用的 RT-PCR 方法分为一步法和两步法，每种方法都各有优缺点，简要概述如下： 表. 对比一步法和两步法 RT-PCR 定量 RT-PCR
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