高效热启动DNA聚合酶库存

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括高效热启动DNA聚合酶库存在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：高效热启动DNA聚合酶库存
英文名：SuperStar DNA Polymerase
编号：WE0123
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：500U|2500U
  本产品是一种采用最新封闭技术的Taq DNA Polymerase，适用于HotStart PCR。在70℃以下，酶的活性中心被完全封闭，有效抑制了聚合酶活性，并能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。在95℃条件下孵育5分钟后，酶的部分活性得以释放。随着热循环的不断进行，剩余的酶活会源源不断地释放出来，这就使得此酶克服了常规Taq酶容易出现平台期的弊端，其扩增效率大大提高。
  本品进行PCR扩增时，PCR产物3"末端附有一个“A”碱基，可直接用于T/A克隆。本产品具有扩增速度快、特异性好、稳定性好的特点，主要应用于对扩增产物要求量大的PCR和RT-PCR反应。

产品组成：

 

组份	500U	2500U
SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl	100μl	5×100μl
10×PCR Buffer	1.8ml	5×1.8ml

注意：本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50 μ l
SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意： 可以在室温下配制反应液，最好将试剂置于冰上。引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min
变性	94℃	0.5-1 min	25-35个循环
退火	50-68℃	0.5-1 min
延伸	72℃	1 min
终延伸	72℃	10 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的SuperStar DNA Polymerase的延伸速率为1 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

我公司的高效热启动DNA聚合酶库存，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
BL0901 FITC标记羊抗小鼠IgG抗体
CBZ-D-*丙*醇 Laminarin from Laminaria digitata 58917-85-4
PY02-117  药敏试验琼脂  250克  
ARB13798 豚鼠免疫球蛋白G(IgG)血清中含量检测 Guinea pig immunoglobulin g,IgG ELISA KIT
ARB11610 人脱氧尿三磷酸(DUTP)Elisa定量检测 Human deoxyuridinetriphate,dutp ELISA KIT
ARB10881 人抗脊髓灰质炎病毒(PV-Ab)酶免分析 Human anti-poliomyelitis virus antibody ELISA KIT
ARB12539 大鼠胰岛素受体β(ISR-β)含量检测 Rat insulin receptor β,isr-β ELISA KIT
β-环糊精 Phenyl Sepharose 6 Fast Flow (low sub) 7585-39-9
盐*(代"酸")丫啶 Carbol fuchsin 17784-47-3
双[三(羟甲基)*基甲*(代"烷")] Nonadecanoic acid 6976-37-0
CBZ-L-丝*酸 5′-NT 1145-80-8
ARB13876 猪白介素3(IL-3)血清中含量检测 Porcine interleukin 3,IL-3 ELISA KIT
D-山梨醇 Fucoidan 50-70-4
PY02-036  四号琼脂  250克  
BL1150 D-PBS，液体，不含*、*和酚红
9048-46-8 Albumin BovineⅤ  牛血清白蛋白Ⅴ(不含脂肪酸)
ARB11358 人类似RIKEN cDNA A630077B13 基因 含量分析 Human similar to riken cdna a630077b13 gene ELISA KIT
高效热启动DNA聚合酶库存关键词：高效热启动DNA聚合酶,WE0123,SuperStar DNA Polymerase


·游离DNA样本保存管(5ml)
编号：WE0396
英文名称：Cell-Free DNA Storage Tube(5ml)
规格：5ml×5支|5ml×50支
游离DNA保存管可直接用于血样的采集与运输，并稳定其中的游离DNA(Cell-Free DNA)，是由EDTA抗凝剂和特殊的保护剂组成，能够有效抑制血浆中的核酸酶，并避免血液有核细胞中基因组DNA的释放。该产品适用于无创产前筛查与一些疾病的早期诊断相关的研究。
游离DNA保存管中血液样本可按大多数商业化试剂盒进行游离DNA提取，提取后的游离DNA可应用于下游的检测与分析。同时，该产品也能够用于血液有核细胞中的基因组DNA的保存。

·尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)
编号：WE0115
英文名称：Uracil-N-Glycosylase(UNG)
规格：200U|1000U
  尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG酶)也称为尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)，通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，该蛋白分子量为25kD，可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶，并且对RNA无活性，主要应用于防止PCR扩增产物的污染。该酶作用机理为：在PCR反应中以dUTP代替dTTP，扩增产物片段中的T全部被U取代，形成了含dU碱基的PCR扩增产物。UNG酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键，降解反应体系中含U的DNA，有效消除PCR产物的残留污染，大大降低扩增产物污染导致的假阳性，从而保证扩增的特异性和准确性。

活性定义：37℃，60分钟内催化1 nmol尿嘧啶，从含尿嘧啶的DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。

质量控制：SDS-PAGE检测纯度大于95%；经检测无核酸内、外切酶活性。

注意事项：
1、UNG长期储存(非频繁使用; 每月少于3次)请置于-70℃保存，每天或每周使用请于-20℃保存。尽量避免反复冻融，大包装建议分装使用。
2、UNG可以在PCR反应前先清除不慎污染的U-DNA分子，一个实验室必须在所有的PCR反应中使用dUTP作为dNTP之一，使所有扩增产物都成为U-DNA。如单使用于某个检测，T-DNA仍会积累，此抗污染系统也难以起到完全的作用。
3、UNG/dUTP系统是PCR试剂内部的一种防污染措施，为了防止PCR产物的污染，尤其是在临检实验室中反复放大同一片段时，必须严格规范实验室的划分和操作。

使用方法：
以下举例为Taq反应体系防止PCR产物污染的使用方法，实际应用可应根据具体实验进行改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
Taq PCR Buffer，10×	5μl	1×
dATP，10 mM	1μl	200μM
dGTP，10 mM	1μl	200μM
dCTP，10 mM	1μl	200μM
dTTP，10 mM	0.5μl	100μM
dUTP，10 mM	1μl	200μM
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	Xμl
Taq DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
Uracil-N-Glycosylase，1 U/μl	0.2μl	0.2 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

2、反应条件

步骤	温度	时间	循环数
UNG消化	37℃-50℃	5-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	94℃	30 s	30-40个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	1 kb/min
终延伸	72℃	5 min

注意：通常将Taq酶与UNG酶按一定的比例加入PCR反应体系中，先于37℃-50℃范围内消化5-10分钟，然后95℃ 10分钟灭活，(同时这一步也达到预变性和热启动的效果)，随后进行PCR扩增。UNG酶的反应可以在37℃-50℃，5-10分钟的范围内变化，可以根据实验的需要进行调整。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


高效热启动DNA聚合酶库存关键词：高效热启动DNA聚合酶,WE0123,SuperStar DNA Polymerase

002018 EDTA抗凝牛血 100ml|500ml
ARB10656 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA检测服务 Human von willebrand factor,vwf ELISA KIT
BTN130835 低熔点琼脂糖 Low Melting Agarose
矮壮素 Triton x-114 999-81-5
BTN130518 醛基磁珠 Magnetic beads,Aldehydic
ARB13813 豚鼠总抗氧化能力(T-AOC)ELISA代测服务 
ARB10550 human皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)酶联免疫定量检测 Human cutaneous lymphocyte-associated antigen,cla ELISA KIT
聚肌苷酸 DL-Arginine HC1 30918-54-8
ARB12249 大鼠血管活性肠肽(VIP)Elisa分析 Rat vasoactive intestinal Peptide，vip ELISA KIT
F020215 兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG
ARB10620 人血栓素A2(TX-A2)检测服务 Human thromboxane a2,tx-a2 ELISA KIT
ARB11997 大鼠P物质(SP)ELISA代测服务 Rat substance p,sp ELISA KIT
BL0629 羧基-琼脂糖凝胶4B ECH Sepharose 4B
BTN130857 T4 RNA连接酶 2(截短型 K227Q) T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)
PY04-047  万古霉素  1mg/支×10支  每支添加于100ml改良月桂基硫*(代"酸")盐胰蛋白胨肉汤(mLST)培养基中制成mLST-Vm，用于阪崎肠杆菌分子生物学检验方法选择性增菌培养
115-39-9 Bromphenol  Blue  *酚蓝
BL0901 FITC标记羊抗小鼠IgG抗体

我公司正在打折促销核酸扩增(PCR)全系列产品，恭候您的咨询选购高效热启动DNA聚合酶库存。