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- 上海谷研
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
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- 细胞类型：
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- 肿瘤类型：
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- 供应商：
上海谷研
- 库存：
59
- 英文名：
Rat Bone PrimacellTM：Normal Articular Chondrocytes
- 生长状态：
贴壁；悬浮
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 细胞形态：
详见说明书
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
1.2ML/1.5ML
大鼠软骨细胞分离自正常大鼠软骨组织，软骨细胞主要功能：（1）软骨是人身体中唯一不会发生癌变的组织。（2）骨骼在发育初期大部分是由软骨构成的。（3）软骨一般起到承重负荷，减少关节间骨骼摩擦等作用。生物科技提供的大鼠关节软骨细胞，均来自新鲜组织。细胞的培养采用公司专利产品大鼠关节软骨细胞培养试剂盒(Rat BonePrimaCell: Normal Articular ChondrocytesCat No.3-4022)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，大鼠关节软骨细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然关节组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的关节组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的关节组织片能使得关节组织中成关节细胞的一些功能特性发生改变，从而将成关节细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成关节细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的成关节原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠关节软骨细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的成关节组织细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠关节软骨细胞细胞组织解离液（3×1ml） （2）大鼠关节软骨细胞细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠关节软ᰀ
实验操作：
1、 鼠关节软骨细胞培养试剂盒品牌新生小鼠拉颈椎处死，乙醇消毒腿部，在超净工作台内，取肌肉于平皿，Hank’s洗3次，剔除脂肪、结缔组织，将肌肉标本剪约0.1cm3小块；
2、 将剪碎的肌肉移至离心管，Hank’s洗3次，静置1min，弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶，37度水浴消化20min，每5min摇动或吹打1次离心管，然后加入生长培养基终止消化；
4、 反复吹打后，依次100，200，400目过筛，滤液收集后，1000r/min离心10min；
5、 弃去清夜，用生长培养基重悬细胞，悬液加入未经PPL包被的培养瓶中，差速贴壁去除成纤维细胞，37度培养1h后，转移包被瓶中，生长培养基培养，4d换液，以后每天换液1次。
实验试剂：
1、鼠关节软骨细胞培养试剂盒品牌培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S
4、染色液： 0.4% Trypan Blue
5、消化液： PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂：鼠抗人及大鼠desmin一抗，肌球蛋白（myosin）单克隆抗体
服务特点：
1. 鼠关节软骨细胞培养试剂盒品牌细胞纯度高：原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上；
2. 细胞活力强：原代分离的细胞一般不能长久传代，提供P0-P3代的细胞，活力达80%以上，无污染；
3. 多种鉴定方式：可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
原代细胞分离：
一、鼠关节软骨细胞培养试剂盒品牌细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏（可参阅后面有关章节）为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验
精胺氮氧化加合物Spermine136587-13-8
精胺二磷酸盐Sperminesalt
精胺磷酸盐六水合物SpermineHexahydrate
精胺四盐酸盐;盐酸精胺Spermine306-67-2
精噁唑禾草灵(标准品)Fenoxaprop-P质量规格：分析标准品
精喹禾灵(分析标准品，98%)Quizalofop-p-ethyl质量规格：分析标准品，98%
精乙基噁唑禾草灵(标准品)Fenoxaprop-p-ethyl质量规格：分析标准品,97%
井冈霉素Validamycin质量规格：>98%,BR
久洛尼定(>97.0%(GC)(T))Julolidine质量规格：>97.0%(GC)(T)
酒石黄；柠檬黄；酸性黄231934-21-0
酒石酸铵(>99%，BR)L-Ammonium3164-29-2
酒石酸伐伦克林(标准品)Varenicline375815-87-5
酒石酸伐伦克林Varenicline375815-87-5
酒石酸钾钠四水Potassiumtatrate,
酒石酸钾一水(>98%,BR)Potassiumhydrate
鼠关节软骨细胞培养试剂盒品牌睾素3检测试剂盒 规格： 48T/96T
睾酮检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜突蛋白检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜铁转运蛋白检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜铁转运蛋白检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜铁转运蛋白检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜辅蛋白检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜联蛋白A1检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜联蛋白A1检测试剂盒 规格： 48T/96T
膜联蛋白A10检测试剂盒 规格： 48T/96T
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文献和实验细胞来说要少很多。 最后，针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题，这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话，那就使用超速离心的方法，按照前文建议的预处理操作后，超离后的沉淀也会增加的，同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下，也可以通过试剂盒的方法来提取，除了进口品牌外，也可以使用一些国产试剂盒，质量也不亚于进口品牌的。 总结一下，为了获得高质量的外泌体：需要在细胞培养时减少正常血清的使用，推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基；收获
脾脏（spleen）位于上腹部左后侧，体积较大，长条形，是体内最大的淋巴器官，也是血流通路中的过滤器官。脾脏内定居着大量的淋巴细胞和其它免疫细胞，是机体发生特异性免疫应答的场所。 1 原理 单个核细胞的体积、形态和比重与其它细胞不同，在沉降过程中不同比重的细胞会处于不同的分布位置。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个核细胞分离开来。 2 方法 1）无菌条件下取出脾脏，在培养皿中加入适量的分离液，将脾脏放入细胞筛中，置于分离液中进行研磨（具体
液层和红细胞层（见图1）。 图1 稀释脐带血离心前后的分层状态图 5） 向离心管中加入10mL 的RPMI 1640培养基洗涤细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1） 血液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24h内的血液进行CBMC分离。 2） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械性的损伤。 3） 为保持细胞状态良好，请尽量缩短整个试验的周期。 4 脐带血单个核细胞分离试剂盒
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