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文献和实验结论:m6A 参与了 EMT 的过程,并且非常重要!!2.EMT 过程中 m6A 调控的核心基因的鉴定;既然确认 m6A 在 EMT 中存在调控功能,因此下一步就是对被调控的基因进行鉴定了。作者使用 meRIP-seq 实验,对 EMT 前后细胞中 RNA 的 m6A 修饰状况进行了研究。发现 EMT 前后 m6A 的 motif、RNA 功能区的分布和基因组上的分布都没有显著区别,但鉴定出了 128 个 m6A 修饰水平存在显著差异(1.5Fold)的基因,这些基因的功能进行分析发现与癌细胞中的粘附
Nat Commun:肖东/孙妍课题组合作揭示 m6A 修饰调节细胞自噬的新机制
27a 与 METTL3 结合减弱显著抑制 METTL3 泛素化降解,是导致饥饿时 METTL3 蛋白稳定性和丰度增加的主要原因。 图 2 YTHDF3 需要 METTL3 介导的 m6A 修饰来促进自噬 (图源:Hao WC, et al., Nat Commun, 2022) 为探究 YTHDF3 识别 mRNA m6A 修饰诱导自噬的具体机制,研究者运用饥饿诱导的 MEFs 细胞模型通过 RIP 和 MeRIP 测序(图 3a-f),并运用 RNA EMSA 等实验(图 3 g-k),证实 METTL3
作用:Mammosphere Assay;(2) ALKBH5介导了缺氧对ALDH阳性乳腺癌细胞的促进作用:流式细胞学分析;5. 过表达ALKBH5进行回复实验以及稳定干扰ALKBH5后进行体内实验至此,整篇文章便结束了,由简图可以看出,铁打的缺氧和ALKBH5,流水的下游,每一个部分的逻辑大致均为“缺氧—现象”、“缺氧—ALKBH5—现象”,最后形成了这个逻辑链这篇文章要解决的关键问题很简单,就是将ALKBH5与m6A NANOG构成因果关系,然后串联上下游形成完整逻辑链,使用的研究m6A的方法也十分简单
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