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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 供应商：
吉锐生物
- 规格：
50 rxns
该载体系统能够让您仅靠单个载体就可以轻松地完成基因组DNA的编辑，实现精准、低off-target的基因编辑体验。
吉锐生物为您提供完整的基因敲除解决方案，从敲除方案设计→敲除位点设计→载体构建→转染→敲除检测→结果分析，让您的实验一次成功！
❀组份列表
❀产品特点
● 精准的修饰：Cas9蛋白切割位点高度特异性，降低脱靶效应，实现精准的基因编辑
● 敲除效率高：较传统技术和TALEN、ZFN技术，敲除效率最高；CRISPR/Cas9系统集两大功能组件于一个载体上，转染效率更高
● 实验周期短：不需要中间载体，仅需1天即可完成载体构建
● 可持续使用：提供环状载体，可持续扩增
❀贮存条件
● 在收到货后，请您将 pP1C系列载体瞬时离心后再保存； 载体总量为20μl（200ng/μl）。
● 短期保存，请将 pP1C系列载体置于-20℃保存，且避免污染。若长期保存，请转化大肠杆菌，并使用甘油菌进行保存。
● 请将G-force Enzyme、5xG-force Buffer置于-20℃保存，使用过程中避免反复冻融，保质期为一年。
❀实际操作案例
以拟南芥AtRAN1基因为例进行oligo实操设计
（1）您可以通过以下在线工具设计：
CRISPR Design：http://cbi.hzau.edu.cn/cgi-bin/CRISPR
（2）选取
atttttcagGCTCTACCTAACCAGCAAACCGTAGATTATCCCAGCTTCAAGCTTGTCATTGTTGGTGATGGAGGCACAGgtacggt
（3）输入序列信息（以拟南AtRAN1基因为例）（4）点submit，出现右侧结果；
（5）根据左边不同Guide序列score的高低选取合适的Guide序列，score的高低并不代表敲除效率的高低，所以为提高敲除的成功率，一般选择2-3个Guide序列，构建2-3个敲除载体。1）标题：Targeted mutagenesis in cotton(Gossypium hirsutum L.) using the CRISPR/Cas9 system
文献链接：https://www.nature.com/articles/srep44304
2）标题：CRISPR/Cas9-mediated efficient targeted mutagenesis in Chardonnay (Vitis vinifera L.)
文献链接：https://www.nature.com/articles/srep32289
❀公司荣誉资质
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用户评价
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文献和实验对lncRNA设计干扰片段，再将该片段构建入病毒载体中。该载体除了可以直接瞬时转染细胞用于lncRNA的干扰，也可以包装成慢病毒，用于动物水平干扰lncRNA。 lncRNA敲除：用CRISPR/Cas9技术对lncRNA进行敲除。针对lncRNA某条片段的两端分别设计多条sgRNA序列，实现大片段删除，从而达到敲除的效果。将sgRNA序列构建入病毒载体中，再将Cas9序列装入另一载体中，随后两种病毒同时感染目的细胞进行敲除。 lncRNA靶基因寻找：方法基本类似于上面表述的miRNA双荧光
的单个表皮细胞中，能瞬时干扰基因的功能 [1，29, 30 ] 。 在禾谷类作物中，另一种有效沉默基因的方法是 VIGS [ 31 ] 。 这种方法采用改造的病毒侵染植物，病毒中含有的植物基因片段的转录产物能使目的基因瞬时失活[ 32~34 ] 。病毒 RNA 在自我复制中产生 dsRNA。由于可将转录产物直接侵染成株，VIGS 不仅在遗传转化费时的植物转化研究中特别有效，而且在植物看家基因、胚 发育（敲除导致胚致死的基因）关键基因的研究中也极其有用。通过简单的摩擦，即可将 VIGS 载体
1. 引言 每一次独立的转化事件或采用不同的转基因策略，都会导致植物基因组中外源基因插入模式和位点数目的差异。在过去的 30 年里，农杆菌介导的转化方法是植物转基因技术的主流[1 ]。 20 世纪 80 年代，其首先应用于双子叶植物的转化[2]；90 年代，在单子叶植物的转化中获得成功 [3 ]。此外，基因枪 [6, 7 ] 和原生质体转化技术[4, 5 ] ，对于转基因技术基础和应用研究也是重要的补充 [ 8 ]。目前，除了一些依靠小片段同源序列相关的整合方法外[ 9 ]，大多数植物
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