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深圳市拓普生物科技有限公司
高效液相色谱(HPLC)优点:
1.高压:液相色谱以液体作为流动相(称为载液),液体流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。在现代液体色谱中供液压力和进样压力都很高,一般可达到15~30MPa,甚至可达MPa
2.高速:高效液相色谱的流速较之经典液体色谱快得多,一般可达l—10mL/min, 个别可高达100mL/min以上,这已近似于气相色谱的流速。 高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于1h 。
3.高效:气相色谱的分离效能很高,高效液相色谱的柱效则更高,一般约可达 60000理论塔板/米;近来研究出许多新型固定相,使分离效率大大提高。
4.高灵敏度:紫外检测器的最小检测量可达毫微克数量级(10-9 g);荧光检测器的灵敏度可达10-11g。高效液相色谱的高灵敏度还表现在所需试样很少;微升数量级的样品就足以进行全分析。
适用范围:
适用于有机物纯度分析、有效物质含量测定、副产物分析。广泛应用于食品安全、环境监测、化工等行业。
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文献和实验High performance liquid chromatography (HPLC) is the gold standard methodology for the HbA1c test. By manipulating the flow rate of the liquid (i.e. mobile phase) and the temperature of the HPLC column (i.e. stationary phase), it is possible
HPLC用水可以通过以下几个方面来得到: 1、专门的纯水机或超纯水机; 2、去离子水重蒸; 3、二次或三次重蒸水; 4、采用类似家用的纯水机; 5、市场上瓶装的纯净水或蒸馏水; 6、其它途径 不管采用何种途径,配制流动相应用新鲜水,水质越高放置时间越短。 理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水,并通过0.22um的滤膜,除去热源、有机物、无机离子及空气等。
目前液相色谱的填料主要为硅胶及其键合硅胶。硅胶的主要优点是柱效高,机械强度高,物理性质如孔结构、孔径、比表面积和孔径易于控制,通过表面改性可获得多种功能固定相.在高效液相色谱的发展的过程中曾使用过大颗粒全多孔硅胶、表面多孔的颗粒、小颗粒全多孔硅胶。高效液相色谱使用中孔和大孔全多孔的硅胶。现代高效液相色谱填料绝大多数用键合的方法将活性基团接枝到基质上,全多孔硅胶是使用最为普片的基质。但硅胶基质存在如下缺点: (1)硅胶填料稳定pH范围较窄,硅胶在温和碱性条件下不稳
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