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细胞脂质过氧化物检测试剂盒

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      Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测

    • 供应商

      上海研卉生物科技有限公司

    • 库存

      3

    • 规格

      50ug*5

    细胞脂质过氧化物检测试剂盒

    特点:
    ● 特异性检测铁死亡相关的脂质过氧化● 比BODIPY C11更适合于胞内定位 ● 铁死亡常见指标之一

    规格性状

    性状:深红色结晶粉末或固体。

    纯度(HPLC):90.0%以上

    核磁共振谱:符合一致性

    <使用次数>每50µg可用5-50次

    产品概述

    Liperfluo是Spy-LHP的类似物,可用于检测脂质过氧化物 (LPO),Liperfluo会被脂质过氧化物特异性氧化而在乙醇等有机溶剂中发出很强的荧光。由于氧化型Liperfluo的激发和发射波长分别为524 nm和535 nm (均为长波长),因此可以减轻光对测定样品的损伤和降低样品的自发荧光。由于Liperfluo在二异喹  .啉环的一个末端连接有四乙二醇基团,因此提高了它在水溶液中的分子分散性。虽然它的氧化型在水溶液中几乎没有荧光,但是在细胞膜等脂溶性高的部位会产生较强的荧光。因此Liperfluo适用于活细胞中脂质过氧化物的荧光成像或流式分析。

    特点

    1)能够成像和检测细胞中的脂质过氧化物

    2)长波长激发,可以减少光损伤和自发荧光对细胞的影响

    3)高度脂质过氧化物特异性

    研究领域

    在铁死亡研究中:

    作为细胞死亡形式之一,在铁死亡研究中使用到Liperfluo

     

    原理

    Liperfluo是Spy-LHP的类似物,可用于检测脂质过氧化物 (LPO),Liperfluo会被脂质过氧化物特异性氧化而在乙醇等有机溶剂中发出很强的荧光。由于氧化型Liperfluo的激发和发射波长分别为524 nm和535 nm (均为长波长),因此可以减轻光对测定样品的损伤和降低样品的自发荧光。由于Liperfluo在二异喹  .啉环的一个末端连接有四乙二醇基团,因此提高了它在水溶液中的分子分散性。虽然它的氧化型在水溶液中几乎没有荧光,但是在细胞膜等脂溶性高的部位会产生较强的荧光。因此Liperfluo适用于活细胞中脂质过氧化物的荧光成像或流式分析。

     

    操作步骤

    1.在培养皿或孔板中接种细胞。

    2.去除上清液,用无血清培养基洗涤细胞1次。

    3.加入适量的Liperfluo工作溶液,37℃孵育30 m in。

    *根据实验条件等不同因素,Liperfluo的最佳浓度也不同。需要提前摸索条件。

    4.去除上清液并用无血清培养基洗涤细胞2次。

    5.在荧光显微镜下观察细胞或使用流式细胞仪分析细胞。

     

    实验例

    用激光共聚焦荧光显微镜观察HeLa细胞

     

    1) 在 -slide 8孔板中 (ibidi公司) 接种H eLa细胞 (3.0×10 4 个/孔、含10% 胎牛血清M EM 培养基),

    在37℃ 5% 的C O 2 培养箱中过夜培养。

    2) 去除培养基,用无血清M EM 培养基清洗细胞1次。

    3) 将200 l用无血清M EM 培养基稀释的1 m ol/l的Liperfluo 溶液加入8孔板中,

    在37℃ 5% 的C O 2 培养箱中培养30 m in。

    4) 去除溶液,用200 l H BSS清洗2次。

    5) 均匀地加入200 l用H BSS稀释的500 m ol/l的 t-BHP (tert-Buthyl Hydroperoxide) 溶液,

    在37℃ 5% 的C O 2 培养箱中培养60 m in。

    6) 用共聚焦荧光显微镜观察 (激发波长:488 nm ,发射波长:500-550 nm )。

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