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- 2025年07月11日
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上海博湖
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54
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 年限：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
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- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
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- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
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- 组织来源：
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细胞描述
人乳腺癌组织源细胞培养试剂盒乳腺癌是发生于乳房腺上皮组织的一种最常见的恶性肿瘤，主要分为非浸润性癌（原位癌）、早期浸润癌、浸润性癌三种类型。乳腺癌细胞呈上皮样，多角形，贴壁生长，具有无限增殖能力，丧失接触抑制现象，癌细胞间粘着性减弱。此外，易于被凝集素凝集，细胞骨架结构发生紊乱。 虽然乳腺癌组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的乳腺癌组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的乳腺癌组织片能使得乳腺癌组织中乳腺癌组织源细胞的一些功能特性发生改变，从而将乳腺癌组织源细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的乳腺癌组织源细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的乳腺癌组织源原代细胞中成纤维细胞的含量。 人乳腺癌组织源细胞培养试剂盒适合于培养人的乳腺癌组织源组织细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM人乳腺癌组织源细胞组织解离液（3×1ml） （2）人乳腺癌组织源细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM人乳腺癌组织源细胞成纤维抑制剂（1ml（500x）） （4）人乳腺癌组织源成纤维组织洗液（5x100 ml） （5）人乳腺癌组织源细胞生长因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）人乳腺癌组织源细胞基础培养基（5 x100ml） （7）人乳腺癌组织源组织预备液（1 x100 ml） （8）人乳腺癌组织源细胞培养试剂盒使用说明书
细胞传代：
人乳腺癌组织源细胞培养试剂盒1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏：
1. 人乳腺癌组织源细胞培养试剂盒 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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人乳腺癌组织源细胞培养试剂盒悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短
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