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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
细胞系
- 细胞类型:
详见说明
- 肿瘤类型:
肺癌
- 供应商:
镜像绮点
- 库存:
100
- 英文名:
A549/RFP
- 生长状态:
贴壁培养
- 年限:
长期
- 运输方式:
冻存/复苏
- 器官来源:
肺组织
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 免疫类型:
否
- 物种来源:
组织
- 相关疾病:
肺癌
- 组织来源:
肺组织
- 规格:
T25
细胞介绍
该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系,患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带RFP基因。
细胞特性
1) 来源:肺癌
2) 形态:上皮细胞样,多角形;贴壁生长
3) 含量:>1x106 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。

细胞筛选
该细胞为稳定转染RFP的细胞,随细胞传代次数的增加,其RFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。
建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选。
初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选,以此类推,至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%,可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖,可停止筛选,用不含药完全培养基正常培养。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备F-12K(推荐iCell-0007)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
业务范围



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文献和实验查询:www.icellbioscience.com/news/News/blog/1
问: A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 我培养的A549细胞 答1:
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打
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