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- 尚恩生物(SUNNCELL)
- SNL-499
- 2025年11月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | A549+RFP人肺癌细胞 |
| 细胞别称 | A549-RFP；A549（RFP） |
| 细胞货号 | SNL-499 |
| 来源 | 通过慢病毒转染的方式携带RFP基因；嘌呤霉素筛选维持荧光强度； |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 收录 | 自转 |
| 生物安全等级 | 2 |
| 培养条件 | F12K+10% FBS+1% P/S（货号：SNLM-499) |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | A549+RFP细胞是通过慢病毒转染A549细胞的方式使之携带RFP基因，为稳定转染RFP的细胞，但随细胞传代次数的增加，其RFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为1ug/mL嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含2ug/mL嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为5ug/mL。若筛选过程中，漂浮细胞大于60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可再次加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/mL嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药完全培养基正常培养。 |
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文献和实验我培养过不少肺癌细胞（人类），其中绝大部分都是贴壁细胞，具体如： （１） Ａ５４９（肺腺癌） （２） ＮＣＩＨ４４６（小肺细胞癌） （３） ８０１（非小肺细胞癌） （４） ＮＣＩＨ４６０ （大细胞肺癌） 在消化传代过程中，步骤基本一致： 吸去旧的培养液－＞用Ｈａｎｋｓ＇（１Ｘ）清洗一两次－＞加入一定量的消化液（Ｔｒｐｓｉｎ－ＥＤＴＡ）－＞置显微镜下观察，待细胞大部分变圆时，回到超静台－＞吸去消化液－＞加入一定量的新培养液－＞反复吹打细胞－＞再置显微镜下观察，直到细胞全部悬浮起来－＞
要根据细胞的代谢情况和接种密度，把握传代间隔时间。我们养的是肺癌细胞，A549就代谢很快，如果是1比5稀释传代的，也要3天就传一次代，还有的细胞因为恶性度较高，贴壁不好，需要两天传一次。
8.19 改变思路，Cell子刊发现一个可以逆转癌细胞为正常细胞的蛋白
，肺癌细胞与正常细胞相比，Lynx1 的水平有所下降。然而，利用基因组编辑增强 Lynx1 的产生抑制了癌细胞的生长。我们假设通过使用 ws-Lynx1 可以获得一个类似的效应，而它的浓度和效果更容易控制。」IBCh RAS 神经调质和神经受体生物工程研究小组组长、MIPT 物理化学生物学和生物技术副教授、该研究作者 Ekaterina Lyukmanova 说道。他们的实验验证了这一假设。研究人员用 ws-Lynx1 与 A549 细胞孵育 72 小时后，癌细胞数量显着减少，A549 细胞是一种
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