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- 美国
- 2025年12月03日
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- 英文名：
Red Blood Cell Lysing Buffer Hybri-Max™
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100 mL
红细胞裂解缓冲液Hybri-Max™
Red Blood Cell Lysing Buffer Hybri-Max™
liquid, sterile-filtered, suitable for hybridoma
别名: RBC裂解缓冲液
Application
建议在细胞颗粒中加入1 mL缓冲液(细胞颗粒=1个脾脏或1-2亿个细胞)。 轻轻混合1分钟。 用15-20mL培养基活盐溶液稀释该缓冲液。 在250-500 × g 离心7分钟并弃去上清。 细胞可被稀释并准备计数或融合。 如果裂解不完全，可重复1-4步。
Biochem/physiol Actions
红细胞裂解缓冲液已被开发用于杂交瘤实验中，用于在融合前从小鼠脾细胞悬液中去除红细胞。 在需要从细胞悬液(如全血)中去除红细胞的体系中，它也很有用。
Components
含8.3 g/L 氯化铵的0.01 M Tris-HCl 缓冲液。
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致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌：
Roche试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
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文献和实验。 加入2 mL 1×红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解2~3 min后，立马加入10 mL PBS，300 g离心5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬脾脏细胞，将细胞悬液用200目筛网再次过滤后计数, 并调整细胞浓度至1×107/mL。 b) 吹打法 小鼠颈椎脱臼处死，置于75%乙醇浸泡5 min后，取出小鼠，置于无菌操作台上，左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露出脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面
），剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意在该过程中应保留尽可能多的骨髓腔。 拿一支1 mL的无菌注射器，吸取1 mL PBS，轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓。重复2~3次，可冲出绝大部分细胞。冲洗完后，用移液器轻轻吹打细胞，将细胞团吹散。 将冲洗液用200目的滤网过滤，滤液收集于15 mL离心管中，300 g离心5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞，细胞计数，并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项： 骨髓样本细胞分群明显，可以裂解红细胞，也可不裂解。如需裂解红细胞，可以加入
加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯
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