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- 英文名:
Hiscript III Reverse Transcriptase
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一年
- 供应商:
南京诺唯赞生物科技有限公司
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-30 ~ -15℃储存。于-20 ~ 0℃运输
- 规格:
10000 U
HiScript III Reverse Transcriptase
杂质耐受度强、更高效的第三代逆转录酶

逆转录;第一链cDNA合成;两步法qRT-PCR检测;cDNA文库构建

· 广泛的模板兼容性:可兼容动物、植物、病毒等多种模板
· 超强的杂质耐受度:对于常见杂质(乙醇、异丙醇、水平衡酚、腐殖酸)均具有超强的耐受度
· 优异的逆转录效率:与市面常见的逆转录酶相比,具有较高的逆转录效率

以1μg HeLa细胞RNA为模板,按照R302说明书推荐体系进行逆转录,以1μl cDNA为模板,用2 × Vazyme Lamp Master Mix (Dye Plus)(Vazyme #P312)进行长片段扩增,将得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如图所示:扩增条带单一且产量高。

长片段扩增电泳图
注:M:DL15000 Marker(Vazyme #MD103)

本产品为新一代逆转录酶,在37℃条件下即可进行高效率的逆转录反应。本产品依旧保留二代产品的热稳定性,且对于复杂二级结构的RNA,可将逆转录温度提高至50℃-55℃,避免RNA复杂二级结构对cDNA合成的抑制,可有效合成高质量的cDNA。此外,本产品仍具有优异的持续合成能力和强的杂质耐受度。



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文献和实验Reverse transcription is the reverse transcriptase-mediated synthesis of single-stranded DNA (complementary DNA or cDNA) using single-stranded RNA as template; the cDNA product and the template RNA have complementary sequence and can exist
Reverse Transcription of RNA- 20l rxn
4l RT buffer 9l H2 O (RNA to be included in this vol but added last) 2l 0.1 M DTT 1l oligo dT primer 2l 10mM dNTP''s 1l RNasin 1l Reverse Transcriptase incubate for 1hr at 37C then heat inactivate at 70C
Amino-allyl Reverse Transcription
.5 42 degrees for 2 hours Aliquots II. Hydrolysis Add: 10ul 1N NaOH 10ul .5M EDTA Incubate: 15 min. at 65° C. Neutralize: 25ul 1M Tris pH 7.4 or 1M HEPES pH 7.5 III. Cleanup To continue











