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- 英文名:
HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)
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大量
- 供应商:
南京诺唯赞生物科技有限公司
- 规格:
100 rxns (20 μl/rxn)
HiScript II Q Select RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)
可灵活选择逆转录引物的高效的第二代qPCR专用逆转录预混液(去基因组)

第一链cDNA合成;逆转录(含gDNA去除);基因表达分析;两步法qRT-PCR检测

· 可靠的逆转录效率:高效的HiScript II Reverse Transcriptase具有较强的温度耐受能力,确保在高温条件下能打开RNA 复杂二级结构,得到更长的cDNA
· 可灵活选择逆转录引物:针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物
· 带有基因组去除模块:可有效清除高达500 ng基因组DNA

本产品为包含有基因组DNA去除步骤的两步法RT-qPCR选用预混液,产品以高性价比的HiScript II Reverse Transcriptase为基础,使用设计独特的Oligo(dT) 23 VN 引物,提高了反应特异性及灵敏度,获得质量更好的cDNA。针对逆转录后续实验需要,可灵活选择Oligo (dT) 23 VN primer/Random Hexamers 或基因特异性引物(GSP)等不同类型的逆转录引物,满足多样化的实验需求。同时对反应体系进行大幅简化,5 × qRT SuperMix包含有反转录反应除引物以外所需的全部试剂,且在-20℃不会冻结,加入模板RNA和引物即可迅速进行反应,使用方便。试剂盒中的4 × gDNA wiper Mix可去除残留的基因组DNA污染,保证后续定量结果更加可靠。逆转录得到的产物可用于SYBR Green qPCR分析法和探针分析法,进行高性能的基因表达分析。





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文献和实验大家一臂之力,里面包含单独成管的 Oligo (dT)20VN 及 Random hexamers,可以根据模板类型和后续实验需求灵活选择或按比例混和;还有 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)(R323),包含逆转录反应所需的所有组分,当然 Random primers 和 Oligo (dT)20VN 的混合引物也直接在这管 SuperMix 中,只需加入模板 RNA,20 min 内即可完成逆转录反应,极为方便! 第三个选择就是基因
。此外,QIAGEN还提供专门用于Rotor-Gene Q的 Rotor-Gene Multiplex PCR和RT-PCR Kit。所有这些试剂盒都是为基因表达分析设计的,能同时检测最多4个目标,用在两步法和一步法RT-qPCR中。这些试剂盒特别适合低丰度的转录本,能检测低至10个拷贝。 如何提高成功率 建立多重反应的步骤如下:1)优化引物和探针序列,2)选择标记探针的报告基因和淬灭基因,3)优化单重实验,4)验证多重实验,5)必要时,优化多重实验。在开始多重PCR前,需要记住几件
样。比如 Yeasen 的荧光定量酶就分为配体法热启动酶和抗体法热启动酶,关于这两种酶反应条件的设定需要注意以下几点:1、设置程序时要注意配体法的预变性为 95℃,5 min;抗体法的预变性为 95℃,30s。;2、选择两步法,可保证产物高特异,选择三步法可保证高效率扩增,小伙伴可根据自己的实验选择合适的程序;3、上机时尽量避免使用最外面一圈的孔。以上就是小编对 RT-qPCR 注意事项的详细总结,希望能够对大家的实验有所帮助。
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