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见说明书
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一年
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现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- CAS号:
/
- 规格:
200μL
产品介绍:
ROX Reference Dye一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪上,用于调整PCR加样误差所引起的PCR管与管之间的差异。不同仪器所需ROX Reference Dye浓度不同。我公司提供ROX Reference Dye 储存液,浓度为25µmol/L,使用终浓度根据不同仪器为50nmol/L 或500nmol/L,用户可以根据仪器的推荐浓度添加。
不同仪器ROX推荐使用终浓度:

从配制PCR反应的水溶液中减去ROX染料的体积
*为使每个反应精确加入0.1µL,推荐使用前将ROX用水稀释10倍,并使用1µL稀释后的溶液。
储运温度:常温运输,-20℃长期保存,避免反复冻融。短期使用可放4℃。
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文献和实验扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书,检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是,需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料,用以校正仪器系统以外的物理误差,比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的,当用此类试剂的时候,应该将 ROX 参比
修饰的 Taq DNA Polymerase,在温度低于 80 ℃ 时活性被完全封闭,只有 95 ℃ 加热至少 5 min 酶的活性才被释放。有效防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增和引物二聚体。 ROX 的选取 ROX:一种不受 PCR 反应影响的参比染料,可校正单次反应运行中的信号误差、移液误差或蒸发所导致的体积差异,提供更连续一致的重复 Ct 值。 不同仪器 ROX 的选取参照卡,拿去~
the dye to use as the passive reference,也就是设置我们反应体系是否含有参比荧光。这里需要根据实际情况进行选择,不正确的定义参比荧光同样会导致最终结果的异常。例如图 7 中实验采用染料法进行相对定量分析,但是结果中的扩增曲线异常(图 7A),排查多组分图时发现 SYBR 在扩增循环过程中荧光信号变化正常,但是细致来看作为参比荧光的 ROX 信号却在整个反应过程中信号接近于零(图 7B)。我们知道扩增图谱纵坐标 ΔRn 的数值是报告基团荧光信号和参比荧光信号的比值
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