- ￥215
- 经科
- 中国
- JKG030
- 2025年10月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
见说明书
- 保质期：
一年
- 库存：
现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- CAS号：
/
- 规格：
200μL
产品介绍：
ROX Reference Dye一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪上，用于调整PCR加样误差所引起的PCR管与管之间的差异。不同仪器所需ROX Reference Dye浓度不同。我公司提供ROX Reference Dye 储存液，浓度为25µmol/L，使用终浓度根据不同仪器为50nmol/L 或500nmol/L，用户可以根据仪器的推荐浓度添加。
不同仪器ROX推荐使用终浓度：
从配制PCR反应的水溶液中减去ROX染料的体积
*为使每个反应精确加入0.1µL，推荐使用前将ROX用水稀释10倍，并使用1µL稀释后的溶液。
储运温度：常温运输，-20℃长期保存，避免反复冻融。短期使用可放4℃。
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文献和实验扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书，检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是，需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料，用以校正仪器系统以外的物理误差，比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的，当用此类试剂的时候，应该将 ROX 参比
the dye to use as the passive reference，也就是设置我们反应体系是否含有参比荧光。这里需要根据实际情况进行选择，不正确的定义参比荧光同样会导致最终结果的异常。例如图 7 中实验采用染料法进行相对定量分析，但是结果中的扩增曲线异常（图 7A），排查多组分图时发现 SYBR 在扩增循环过程中荧光信号变化正常，但是细致来看作为参比荧光的 ROX 信号却在整个反应过程中信号接近于零（图 7B）。我们知道扩增图谱纵坐标 ΔRn 的数值是报告基团荧光信号和参比荧光信号的比值
MasterMix，模板和引物的不同进行优化，达到一个最佳反应体系。在反应体系配置过程中，有下面几点需要注意：1. MasterMix不要反复冻融，如果经常使用，最好溶解后放在4度。2. 更多的配制Mix进行，减少加样误差。最好能在冰上操作。3. 每管或每孔都要换新枪头！不要连续用同一个枪头加样！4. 所有成分加完后，离心去除气泡。5. 每个样品至少3个平行孔。参比或者校正染料（reference dye，passive dye）常用的是ROXTM（现在已经是ABI的注册商标了！）或者其他染料，只要不影响检测
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