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Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒

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  • 2025年07月11日
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    • 供应商

      上海机纯实业有限公司

    • 规格

      100T

    Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒
    Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒(Hoechst 33342/PI Apoptotis Assay Kit)是一种采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)双荧光染色方法进行细胞周期与细胞坏死分析的检测试剂盒。单纯的PI染色能够观察DNA直方图上凋亡细胞的亚G1峰,但只能代表G0/G1期发生凋亡,无法观察S期和G2期发生的细胞凋亡,而且细胞经过固定后无法对活细胞和死细胞进行区分。Hoechst 33342可以穿透细胞膜,进入正常细胞和凋亡细胞与DNA结合,能在紫外线下显示蓝色荧光,而且染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。PI不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,PI可以穿透细胞膜使坏死细胞着色产生红色荧光。Hoechst 33342/PI双染后,可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在二元直方图上,正常细胞对Hoechst33342具有拒染性,呈弱蓝色荧光+弱红色荧光(Hoechst 33342+/PI+);凋亡细胞对Hoechst33342具有嗜染性呈强蓝色荧光+弱红色荧光(Hoechst 33342++/PI+);坏死细胞对PI具有嗜染性,呈弱蓝色荧光+强红色荧光。本试剂盒亦可用荧光显微镜进行观察,检测细胞含量范围一般为0.1~1×106之间。


    Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒注意事项:
    荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
    在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当提高离心力或延长离心时间。
    Heochst 33342与细胞孵育的时间不宜过长,一般控制在20min以内。太长容易引起Heochst 33342的发射光谱由蓝光向红光迁移,导致红色荧光与兰色荧光的比例改变。
    如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化后,制备成单细胞悬液,才可以进行检测
    PI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
     

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    相关实验
    • 关于细胞凋亡的讨论

      膜的改变是这些特征中较早出现的一种。在凋亡细胞中,细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的外侧。Annexin-V是一种35-36 KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白,它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时,可以和外翻的PS结合,从而可以检测凋亡的细胞。发生坏死的细胞其细胞膜上的PS也外翻,因而也会阳性。因此,常用的凋亡试剂除了采用Annexin-V标记之外,还会加一种DNA染料,常用的有PI和7-AAD,由于坏死的细胞膜通透性增高,染料可以进入细胞内和DNA结合,从而可以发荧光,区分出坏死

    • 常用细胞凋亡检测方法(图)

      , PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素(FITC、PE)或biotin标记,以标记了的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞

    • 【求助】凋亡的问题?

      凋亡检测试剂盒产品名称:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒英文名称:Annexin V-FITC & PI Apoptosis Detection Kit产品分类:细胞凋亡检测试剂盒[Apoptosis Assay Kit]产品编号:A0001c检验方法:Apoptosis包 装:20T产品说明:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒 概述产品说明在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V

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