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- gelatins
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- JC9510
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃ 避光
- 库存：
大量
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
30T
聚酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis， SDS-PAGE)，其原理在于聚酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚酰胺凝胶及SDS-聚酰胺凝胶(SDS-PAGE)；非变性聚酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开，主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。
操作步骤(仅供参考)：
1、 配制10%：直接在0.5g Ammonium Persulfate中加入5ml蒸馏水，充分溶解，分装成小份储存于-20℃或4℃。
2、 根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度，按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(下层胶)：
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文献和实验的Western及IP细胞裂解液，可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配 胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE
2. 电泳(Electrophoresis)： (1) SDS-PAGE凝胶配制(参考一些文献资料进行配制) (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。 (3) 上样与电泳 冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。为了便于观察电泳效果和转膜效果，以及判断蛋白分子量大小。 为了电泳方便起见，也可以采用整个SDS-PAGE
蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大。如果使用碧云天生产的Western及IP细胞裂解液，可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒
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