T1感受态细胞

T1 感受态细胞
T1 Chemically Competent   Cell



T1感受态细胞基因型:
F- φ80(lac Z)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rK- mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA
T1感受态细胞简要说明：
T1 感受态细胞是目前生长速度较快的感受态细胞，在平板上 8h 可见克隆，可用于构建克隆，蓝白斑筛选等实验；经 pUC19 质粒检测转化效率可达 1×109cfu/μg。
T1感受态细胞操作说明：
1. 取 100μl 冰上融化的 T1 感受态细胞，加入目的 DNA（质粒或连接产物）并轻轻混匀，冰上静置 25
分钟。
2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基（2YT 或 LB），混匀后 37℃，200rpm 复苏 60 分 钟。
4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或
LB 培养基上。
5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。

T1感受态细胞注意事项：
1. CMbio 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

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