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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
100ml/500ml
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥80.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500ml | 产品价格: | ¥260.0 |
在生物科研领域,经常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多种,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-
NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH4Cl。
自备材料:
胰蛋白酶
离心机
PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
胎牛血清
注意事项:
1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液,即无需在该操作中特意去除RNase。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验红细胞裂解液(Tris-NH4Cl):称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷(Tris)1.3g加水溶解并稀释至500ml。0.22μm滤膜过滤除菌,4℃保存。细胞悬液加红细胞裂解液后,混匀静止4-5分钟,待红细胞完全破碎,1000r/min离心5分钟,弃上清去除红细胞,得到白细胞沉淀。 结果第一次用的时候,觉得还可以,第二次和第三次用的时候离心后发现有絮状物质,不能很好的沉淀出白细胞
于2-8°C不能超过半年(六个月); 2.在使用前,工作液每天都应该新鲜配制放置于室温,当日用不完的弃掉。 以上配方可以在自己的实验室配制后先做预备实验以了解其裂解情况,如裂解不充分或不好,建议购买BD公司、BioLegend公司、Caltag公司、Jingmei公司等商品化溶血素,可以得到更好的裂解效果。 bbdeng 红细胞裂解液(Tris-NH4Cl):称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷(Tris)1.3g加水溶解并稀释至500
肿瘤情况,又兼具了细胞系的可传代、易于高通量筛选等特性。因此,CRC 类器官模型正在广泛应用于药物研究、个性化医疗等领域。 本篇文章基于 Nature Chemical Biology【4】、STAR protocols【5】、Nature protocols【6】和 Cell【7】发表的四篇文章,整理了人类结直肠癌组织来源的类器官培养方案。 图 1. 病人组织来源的 CRC 类器官研究方案【8】 细胞来源 活检样本或手术样本 培养基配方 解离培养基 类器官培养基 红细胞裂解液
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