Tris-氯化铵红细胞裂解液

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  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      上海研谨生物

    • 规格

      500ml

    介:


    Tris-铵红细胞裂解液
     
    在生物科研域,常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多,如 ACK Lysis BufferTris-铵红细胞裂解液、Gey's Lysis BufferTris-铵红细胞裂解液(Tris- NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer),也称 Tris-NH4Cl Lysis Buffer,是一从人、鼠
    或其他哺乳物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分
    NH4Cl
     Tris-NH4Cl Lysis Buffer 经过优化配方,在裂解无核红细胞的同几乎损伤淋巴(Lymphocyte)或其它有胞核的胞。本裂解液经过滤除菌,经过 Tris-NH4Cl Lysis Buffer 的血液或组织细品可以用于后胞培胞融合以及核酸或
    蛋白的提取及各的分析和检测

     
    货号 品牌/规格/主要参数 市场价 货期  
    R20179-100ml   ¥90.00元 2-3天  
    R20179-500ml   ¥310.00元 2-3天  

    成:



    Tris-NH4Cl Lysis Buffer 100ml 500ml 4℃
     

    材料:

    1 胰蛋白
    2 离心机
    3 PBSHBSS、生理水或无血清培
    4 胎牛血清

    操作步骤(供参考)

    (一)组织细本的常操作

    1、制备细: 鲜组织经过胰蛋白或胶原等消化理,通适当方法制
    液,离心弃上清。
    2、裂解: 加入 35 胞沉淀体 Tris-NH4Cl Lysis Buffer柔吹打混匀,裂解 1
    2min。本操作步骤 4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
    3、离心: 4℃400500g 离心 5min,弃色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
    4、如果发现红细胞裂解完全,可以重上述步骤 2 步骤 3 各一次。


     
     

    5、洗:根据实验要求加入适量 PBSHBSS、生理水或无血清培液,柔混匀重沉淀。4℃400500g 离心 23min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。所加入的 PBSHBSS、生理水或无血清培液的量一般大于胞沉淀体 5 倍以上。
    6、如有必要,重上述步骤 5 一次,共洗 12 次。
    7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,数、培等后续实验
    (二)组织细本的快速操作(无需洗)
    1、制备细液:新鲜组织经过胰蛋白或胶原等消化理,通适当方法制
    液,离心弃上清。
    2、裂解:加入 5 胞沉淀体 Tris-NH4Cl Lysis Buffer柔吹打混匀,裂解 1
    2min。本操作步骤 4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
    3、加入 1520ml PBSHBSS、生理水或无血清培液,柔混匀。
    4、离心:4℃400500g 离心 5min,弃色上清,本离心步骤亦可在室温下操作。
    5、如果发现红细胞裂解完全,可以重上述步骤 24 各一次。
    6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,数、培等后续实验

    (三)血液本的常操作

    1、取新抗凝血,400500g 离心 5min,弃上清。
    2、裂解: 加入 610 胞沉淀体 Tris-NH4Cl Lysis Buffer柔吹打混匀,裂解 1
    5min。本操作步骤   4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。(提醒:于鼠的血液, 裂解 12min 于人的外周血,宜延裂解时间 45min,并且裂解程中 轻轻摇动以促进红细胞裂解。)
    3、离心: 4℃400500g 离心 5min,弃色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
    4、如果发现红细胞裂解完全,可以重上述步骤 2 步骤 3 一次。
    5、洗: 根据实验要求加入适量 PBSHBSS、生理水或无血清培液,柔混匀重沉淀。4℃400500g 离心 23min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBSHBSS、生理水或无血清培液的量一般大于胞沉淀体 5 倍以上。
    6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,数、培等后续实验
    注意: 于微量或少量的血液本,可以用第 1 操作,可直接加入 10 倍血液体 Tris-NH4Cl Lysis Buffer 行第 2 操作,并在 4℃或室温裂解 415min于鼠的血液,裂解 45min  于人的外周血,宜延裂解时间 10min,但通常宜超 15min,并且裂解程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。
    (四)血液本的快速操作(无需洗)
    1、新抗凝血中加入10 倍体Tris-NH4Cl Lysis Buffer轻轻吹打混匀,裂解415min本操作步骤 4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。(特提醒:于鼠的血液,裂解
     

    45min 于人的外周血,宜延裂解时间 10min,但通常宜超 15min 并且裂解程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。)
    2、加入 2030ml PBSHBSS、生理水或无血清培液,柔混匀。
    3400500g 离心 5min,弃色上清。4℃离心效果更佳。
    4、如果发现红细胞裂解完全,可以重上述步骤 2 步骤 3 一次。
    5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,数、培等后续实验
     

    注意事

    1、制备细时应根据实验需要,一定要制单细液。
    2、后续试验如果是用于胞培,操作程中注意无菌操作,尽量在超工作台内操作。
    3、离心步骤尽量在 4℃离心机上操作。
    4、常规步骤不快速步骤的区在于:常规步骤多了一涤过程的离心,可以省洗  的用量,并且洗效果也更好,需要大体的离心管;快速步骤少了一次离心程,洗
    效果略差一些,同需要大体的离心管。
    5、离心洗后,通常极微量的红细会影响后检测
    6、如果经过 ACK Lysis Buffer 理后的品后用于 RNA 的提取,在必使用 DEPC 理的溶液,即无需在操作中特意去除 RNase
    7了您的安全和健康,穿实验服并戴一次性手套操作。

    有效期: 12 个月有效。

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