- ￥1000 - 2000
- 上海烜雅
- 国产/进口
- XY-KT-2852
- 2025年07月06日
- ih，wb
- Rabbit，mouse
- h，R，m，r
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
详见说明书
- 亚型：
IgG
- 形态：
Lyophilized or Liquid
- 保存条件：
避光-20℃，保存一年
- 克隆性：
详询
- 标记物：
详询（烜雅可供应生物素、酶、荧光素标记的抗体）
- 适应物种：
h，R，m，r
- 保质期：
一年
- 抗原来源：
Polypeptide
- 目录编号：
XY-KT-2852
- 级别：
生产厂家
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 宿主：
Rabbit，mouse
- 应用范围：
ih，wb
- 浓度：
1mg/ml
- 靶点：
详见说明书
- 抗体英文名：
IL-14
- 抗体名：
IL-14
- 规格：
100-200ul
适应物种：h，R，m，r
级别：生产厂家
纯度：＞95%
浓度：1mg/ml
分子量：详见说明书
形态：Lyophilized or Liquid
克隆类型：Polyclonal
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说明书：请直接向我司客服索取
Western Blotting 内参抗体的选择
在 Western Blotting 中使用内参，就是在试验中用内参对应的抗体检测内参蛋白。内参 就是内部参照，一般是指管家基因编码表达的蛋白，它们在各个组织和细胞中的表达相对恒 定，常用在检测蛋白的表达水平变化时做参照。
利用 Western Blotting 可比较在组织细胞蛋白上样等量时，不同条件或不同组织细胞中 目的蛋白的表达量，特别是当目的蛋白表达量不高时，上样量的的差别就极可能影响结果的 分析。因此，在 Western Blotting 试验中，进行内参的检测，可以校正蛋白质定量、上样过 程中存在的误差，保证实验结果的准确性；此外，内参可作为空白对照，检测蛋白转膜是否 完全、整个 Western Blotting 显色发光体系是否正常。目前，在国内外发表的文章中，Western Blotting 作内参校正已成为一种惯例。
内参抗体种类很多，比如 β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、Lamin B、PCNA、Na+/K+ ATPase 等，下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则：
一、样本种属来源
首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。
哺乳动物的组织或者细胞样本，通常选择 β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、PCNA、 Na+/K+-ATPase 等。
植物来源实验样本，则可以选择 Plant actin、Rubisco 等。
其他来源样本研究较少，所以就应该参照文献报导，选择合适的蛋白作为内参。
- 目的蛋白分子量
- 目的蛋白表达部位
胞核蛋白：PCNA 等
核膜蛋白：Lamin B 等
胞膜蛋白：Na+/K+-ATPase 等
线粒体蛋白：COX IV、VDAC1 等
以上几条原则只是针对通常情况，但是需要注意的问题是——内参的选择需要考虑实 际的试验环境。比如某些细胞中，由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致 GAPDH 的表达增 高，不适合做内参；比如在在凋亡实验时，Lamin 等也不适合作为内参。因此设计实验方案 的时候应该考虑这些因素并查询相应文献，也应该注意内参表达出现异常，。
- 烜雅生物提供了多种内参蛋白抗体,帮助客户选择最合适的内参蛋白抗体。
β-Actin
Actin 即肌动蛋白，是细胞的一种重要骨架蛋白。Actin 大致可分为六种，其中四种是不 同肌肉组织特异性的，其余两种广泛分布于各种组织中，包括 β-actin 和 γ-non-muscle actin。 针对大多数组织和细胞来说的，β-actin 作为内参是公认的，它由375个氨基酸组成，分子量 大小为42KD 左右，广泛分布于细胞浆内，表达量非常丰富，其含量占所有细胞总蛋白的50%。 但是在某些特殊的情况下，如脂肪组织或细胞内，β-Actin 的表达量就很少。
实验图例：
Tubulin
Tubulin 即微管蛋白，是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin 分为 α、β、γ、δ、ε 等多种 tubulin， 其中 α-Tubulin 和 β-Tubulin 可以形成异源二聚体，也是形成微管的最主要的两种 Tubulin。 α-tubulin 和 β-tubulin 分子量分别为55kDa 和50kDa，其实际检测条带均在55kDa 左右。作 为内参，β-tubulin 的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于 Western Blotting，其作 为上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色，观察细胞的微管结构。
实验图例：
GAPDH
GAPDH 即甘油醛-3-磷酸脱氢酶，是参与糖酵解的一种关键酶，催化糖酵解的第六步, 它还参与核转录、DNA 复制和修复以及细胞凋亡等。它由4个30-40kDa 的亚基组成，分子 量146kDa，检测条带大约在36kDa。GAPDH 基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛 用作 Western Blotting 的内参。但请注意,某些生理因素,如缺氧和糖尿病,会增加 GAPDH 在 特定的细胞和组织的表达。
实验图例：
PCNA
PCNA 即增殖细胞核抗原，因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名，以后的研 究发现 PCNA 与细胞 DNA 合成关系密切，在细胞增殖的启动上起重要作用，是反映细胞增 殖状态的良好指标。它在细胞核内合成，并存在于细胞核内，由261个氨基酸组成，分子量 为29KD。
实验图例：
Lamin B
Lamin B 即核纤层蛋白 B, 是凋亡关键因素 Caspase 家族的作用靶子，受 Caspase 的 剪切而活化，位于核膜。其由 586 个氨基酸组成，分子量为 66KD。
实验图例：
Na+/K+-ATPase
Na+/K+-ATPase 即 Na+/K+-ATP 酶或 Na+/K+-ATP 泵，它会使细胞外的 Na+浓度高于细 胞内，当 Na+顺着浓度差进入细胞时，会经由本体蛋白质的运载体将不易通过细胞膜的物 质以共同运输的方式带入细胞。其由 1023 个氨基酸组成，分子量为 113KD。
实验图例：
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