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- 百奥莱博
- JN0107-POR
- 北京
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
209
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
20次(1μg)
特别提示：包括pBalbTrx-EK质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：pBalbTrx-EK质粒
产品货号：JN0107
产品规格：20次(1μg)
本质粒以Nco I线性化方式提供，请配合BalbRec PCR产物一步无缝克隆试剂盒使用（CatNo. JN0001）。
Trx是实验室中最常用的融合标签之一，能够促进目标蛋白质的溶解性和正确折叠。在需要用肠激酶（Enterokinase, CatNo. PJN0015）切除的时候，由于S Tag中存在非特异性降解位点，酶切条件难以控制，常出现两条标签带（17KD,14KD），pBalbTrx通过删除部分氨基酸序列，在保留原有Trx融合蛋白质优势的同时，避免了非特异性酶切，使酶切结果的判断和目标蛋白质的分离变的更加方便。在不希望使用肠激酶切割时，也可通过KpnI或BglII位点引入Tev或其他蛋白酶切割位点。
目的基因扩增按常规方法设计引物后，在5′端引物前添加以下序列：GAC GAT GAT GAC AAG； 3′端引物前添加：TTC GGA TCC GAT ATC。注意：5′端引物从第一个氨基酸不能为Pro。不希望目标蛋白C端保留His Tag时，3′端引物需要加入终止密码子。
产品组成：
| 组份 | 规格 |
| pBalbTrx-EK | 1ug |
| BalbRec 重组酶 | 20μl |
| 10×BalbRec 重组缓冲液 | 50μl |
| Control Insert（50 ng/μl） | 10μl |
| 附赠 | |
| 2×pfu MasterMix (快速上样型) | 1ml |
| 2×Fast Taq MasterMix(快速上样型) | 1ml |
| DNA Ladder 2000 Plus | 100μl |
图示上：经典Trx标签，不同用量的 EK酶切后标签被非特异酶切为两个片段（过量酶切会产生多个片段，未示），右图为BalbTrx-EK，酶切后显示单一的标签。
质量控制：pBalbTrx-EK线性化载体经过严格的自连测试以及连接效率测试。
除了pBalbTrx-EK质粒,，我公司还供应以下相关产品：
名称：平末端DNA加A试剂盒
货号：BTN60105
规格：50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dATP 存在的情况下，在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴，使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下：
产品特点：
1. 简单，2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 50μl |
| 2×Tailing Buffer | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一：反应前纯化处理：
用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/氯*抽提或Proteinase K处理)，否则它们将在加A反应时，切除掉加上的A尾巴，干扰反应。可以采取胶回收和酚/氯*抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。
二：加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入下列成分：
| 回收的DNA片段 | 0.2-2ug |
| 2×dA Tailing Buffer | 25μL |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时 | |
三：反应后处理
加A反应后，Taq DNA pol
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文献和实验指将生物或生物资料通过生物的手段而封闭起来，使其不向实验者、实验室外的人及环境中扩散。例如在作DNA重组时，对连结供体DNA小片的载体（质粒、病毒等）与使其增殖的寄主细胞，尽可能选用在实验室外生存、增殖及扩散等可能性小的种类。重组DNA实验，规定了二阶段遏制水平（称B1 、B 2 ）。对大肠杆菌K 1 2 株的寄主载体系统（EK系）的此二阶段遏制水平，分别称为EK 1 、EK 2 。要根据实验目的及可用的安全设备，来选择寄主-载体系及生物遏制的水平。
pET 系统是在大肠杆菌中克隆和表达重组蛋白的最强大系统。根据最初由 Studier 等开发的 T7 启动子驱动系统， Novagen 的 pET 系统已用于表达成千上万种不同蛋白。 控制基础表达水平 pET 系统提供 6 种载体 - 宿主菌组合，能够调节基础表达水平以优化目标基因的表达。没有单一策略或条件适用于所有目标蛋白，所以进行优化选择是必要的。 宿主菌株 质粒在非表达宿主菌中构建完成后，通常转化到一个带有 T7 RNA 聚合酶基因的宿主
〔 1〕指在重组 DNA实验中所用寄主与载体的一组。最广泛应用的有以大肠杆菌（ Escherichia coli） K12株及其质粒或噬菌体分别作为寄主和载体，所以一般称为 EK系。此外，有以革兰氏阳性细菌之一的枯草芽孢杆菌（ Bacillus ubtilis） Marburg 168株及其质粒或噬菌体组合成的 BS系。在真核生物中，有以酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae） 与其质粒所组成的 SC系等。也有用由动物细胞与其病毒组合成的系统
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