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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
472
- 英文名:
Protease Inhibitor for His-tagged Protein
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
- 规格:
10mL
特别提示:包括His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂
英文名称:Protease Inhibitor for His-tagged Protein
产品货号:BTN130530
产品规格:10mL
His-Ni亲和层析是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法,纯化过程中,为防止各种蛋白酶降解重组蛋白,需要加入足够、特异的蛋白酶抑制剂。本产品即为优化的His标签蛋白蛋白酶抑制剂混合液。专门用于纯化His标签蛋白时,抑制各种内源和外源蛋白酶活性,防止重组表达蛋白质降解。本品抑制谱广,能特异性抑制丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天门冬氨酸蛋白酶、嗜热菌蛋白酶样蛋白酶和氨基肽酶等各种蛋白酶活性。本产品为DMSO溶液。与各种细菌细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
除了His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂,,我公司还供应以下相关产品:
名称:谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖)
货号:BTN120101
规格:2mL
谷胱甘肽琼脂糖亲和基质是结合谷胱甘肽(GSH)的4%浓度的交联珠状琼脂糖基质,可用于结合和分离纯化带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)等谷胱甘肽亲和性蛋白质分子,特别是重组表达的GST融合蛋白。可用于带有GST标签的重组蛋白的纯化和GST pull-down实验。
产品特点:
1.特异性高,不与非GST融合蛋白相结合。
2.高结合量,每毫升基质可结合5~10mg重组GST融合蛋白。
3.高度灵活,可填装任意品牌的柱子。
储存条件:低温运输,4℃保存(切勿冻结),有效期一年。
名称:细胞线粒体纯化试剂盒
货号:YT043
规格:50-100次
本试剂盒用于快速便捷分离培养细胞线粒体,在分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白,可用于研究细胞色素c等线粒体蛋白向胞浆的释放。
使用本试剂盒分离获得的线粒体纯度较高,并且绝大部分分离获得的线粒体都含有完整的内膜和外膜,并具有线粒体的生理功能。因此本试剂盒分离得到的线粒体可以用于线粒体的生理功能等方面的研究。例如可以使用百奥莱博的YT148线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测定分离得到的线粒体的膜电位。
本试剂盒分离得到的线粒体也可以被试剂盒中的线粒体裂解液或其它适当裂解液裂解后用于SDS-PAGE、Western、双向电泳等蛋白分析。
本试剂盒提供了线粒体制备过程中匀浆程度的重要判断指标,即台盼蓝染色,使分离得到的线粒体的质量更加有保证。台盼蓝染色液为选用试剂,在实验条件成熟后可以不必使用。
本试剂盒提供了蛋白酶抑制剂PMSF,使匀浆时蛋白酶的活性被适当抑制,这样在获得线粒体的同时还可以获得有时有用的去除了大量线粒体的蛋白,在进行蛋白或酶活分析时可以作为对照。如果每个样品的细胞数量为2000-5000万,本试剂盒可以处理50-100个样品。
试剂盒组份:
线粒体分离试剂———125ml
台盼蓝染色液————10ml
线粒体储存液————15ml
线粒体裂解液————15ml
PMSF(晶体)—————可配制1.5ml 100mM PMSF
PMSF(溶剂)—————1.5ml
注意事项:
1. 试剂盒中的试剂对于不同的实验目的不必全部使用。
2. 如果不是用于制备线粒体蛋白样品,线粒体分离试剂和线粒体裂解液中不必加入PMSF。
3. 如果用于制备线粒体蛋白样品,线粒体分离试剂和线粒体裂解液中需添加PMSF。PMSF一定要在线粒体分离试剂或线粒体裂解液加入到样品中前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。
4. 分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行,所用溶液需冰浴或4℃预冷。
5. 通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g和11,000g,如果希望纯度更高,但对线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可以采用1000g和3500g。
6. 台盼蓝与PMSF对人体有毒,请注意小心防护。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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问:请教一个实验问题,PMSF,胃酶抑制剂以及DTT会不会影响HRP活性?要做ELISA,样品中不知道可不可以加复合蛋白酶抑制剂?请大牛指教!答:不会影响酶活性,因为蛋白酶抑制剂,抑制的是蛋白水解酶活性。而HRP不是蛋白酶类,而是过氧化酶。(不过dtt肯定会破坏HRP)。即使会影响酶活性,实际上做elisa也不影响,因为加样品和加hrp是分开的,不存在。 答:我在研究各种抑制剂对L-氨基酸氧化酶酶活性的抑制作用的时候,测定L-氨基酸氧化酶活性的体系含有HRP。我们首先用各种抑制剂对HRP水解
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