- ¥2035
- fitmens
- EP0162
- 中国
- 2025年10月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温
- 库存：
大量
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海研卉生物科技有限公司
- 抗体英文名：
TdT
- 规格：
2500units
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20 U/µL)
EP0161
500 units
EP0162
2,500 units
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT) is a template-independent DNA polymerase that catalyzes the repetitive addition of deoxyribonucleotides to the 3'-OH of oligodeoxyribonucleotides and single-stranded and double-stranded DNA. TdT requires an oligonucleotide of at least three nucleotides to serve as a primer. With RNA as template TdT shows variable performance which strongly depends upon the tertiary structure of acceptor RNA 3'-end and the nature of nucleotide. Generally, it is lower than using DNA as a template.
Highlights
• Incorporates modified nucleotides (e.g., fluorescein-, biotin-, aminoallyl-labeled nucleotides)
Applications
• Production of synthetic homo- and heteropolymers
• Homopolymeric tailing of linear duplex DNA with any type of 3'-OH terminus
• Oligodeoxyribonucleotide and DNA labeling
• 5'-RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)
• In situ localization of apoptosis
Note
Due to the presence of CoCl2, the TdT Reaction Buffer is incompatible with downstream applications. It is necessary to remove CoCl2 from the reaction mixture by spin column or phenol/chloroform extraction and subsequent ethanol precipitation.
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文献和实验（一）原理 凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后，将DNA 切割成许多双链DNA 片段以及高分子量DNA 单链断裂点（缺口），暴露出大量3- 羟基末端，如用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT ）将标记的dUTP 进行缺口末端标记，则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。 （二）荧光标记法 1 ．材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim 公司In Situ Cell
原位末端转移酶标记技术 （ISEL）检测细胞凋亡 根据细胞凋亡时核酸内切酶被激活，将细胞核染色体DNA从核小体连接处切断，产生单股或双股DNA链。根据这一生化特性，将外源性核苷酸和酶（末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）和DNA聚合酶I或Klenow大片段）渗入到凋亡细胞中，催化标记的外源性核苷酸与断裂的 DNA链相结合，并通过一定的显示系统显色。 由于凋亡细胞内的内源性核酸酶被激活后，将自身染色体或DNA切割，产生与DNA断裂数目相同
置于湿盒中）；同时设立对照： A）阴性对照：每一实验均应设立对照，每孔加50μl标记液（无末端转移酶）代替TUNEL反应混合物； B）阳性对照：每一实验均应设立对照，用微球核酸酶或DNA酶I处理已固定/透化的细胞（1μg～1mg/ml，室温10min），以诱导DNA链断裂。37℃孵育 30min； PBS洗3次； 单个转换和分析：标本吹干，加50μl转换POD（注意要在单层细胞上均匀分布POD，为避免蒸发，将玻片置于湿盒中）37℃ 30min，PBS洗3次，加50～100μl
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