DH5α甘油菌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应DH5α甘油菌，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

规格：200μl
编号：YT025
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博

DH5α甘油菌，是收集生长在对数期的DH5α菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。
DH5α常用于质粒扩增和质粒构建。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。-80℃可以长期保存。
注意事项：
使用本甘油菌时可以不必完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。
为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

使用说明：
1. 划平板接种：
取出DH5α甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。
(1) 用镊子和塑料枪头操作：镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200微升塑料枪头，蘸取少量DH5α甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头，以尽量和LB平板接近平行的角度，在不含抗生素的LB平板上连续作S形或Z形划动，再用一无菌的200微升塑料枪头，在原先的划线上以90或120度角，再在LB平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。
(2) 用接种环操作：将接种环在酒精灯上略略烧一下，使接种环处于无菌状态。微冷后，蘸取少量DH5α甘油菌，在不含抗生素的LB平板上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下，微冷后，在原先的划线上以90或120度角，再在LB平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2-3次即可。37℃倒置培养过夜。
2. 直接培养：
取出DH5α甘油菌置于冰上，并置于超净台内，后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下，并且在酒精灯上略略烧一下，使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签，蘸取少量DH5α甘油菌，然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3毫升LB的细菌培养试管内或装有100毫升或更大体积LB的细菌培养瓶内。37℃，约200rpm培养过夜。
更多有关DH5α甘油菌的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·Caspase-3抗体
编号：YT152
英文名称：Caspase-3 antibody
规格：>20次

本Caspase-3抗体为进口分装，用人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽，经适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度多克隆抗体。
本Caspase-3抗体可以识别全长的Caspase-3(35kD)，也可以识别Caspase-3被剪切后产生的17kD片断。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。
Caspase-3是细胞凋亡过程中最关键的执行分子(key executioner)之一，可以剪切细胞凋亡过程中的许多关键蛋白，例如PARP。Caspase-3的激活需要从没有活性的全长Caspase-3(35kD)，在Asp28和Ser29之间及Asp175和Ser176之间进行剪切，产生有活性的17kD肽段。
Caspase-3的激活常被作为细胞凋亡的一个重要指标。
配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议本抗体使用时的起始稀释比例参考下表(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)。Western检测全长Caspase-3参考下表按照1:1000稀释，检测Caspase-3被剪切后产生的17kD肽段须根据Caspase-3的激活情况酌情稀释。
本抗体如果用于常规的Western检测至少可以检测20次。
保存条件：
Caspase-3抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项：
对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。



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·哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
编号：YT012
英文名称：Mammalian Genomic DNA extraction kit
规格：50次

哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒，采用了经典的蛋白酶K处理法，可以抽提到100-150kb以上的基因组DNA。
用本试剂盒抽提到的基因组DNA适用于Southern杂交、基因组DNA的PCR扩增及基因组DNA文库的构建等。
通常使用本试剂盒，从20毫克组织可以抽提到约40微克基因组DNA，从106-107Hela细胞可以抽提到约5-50微克基因组DNA。
本试剂盒足够抽提50个常规量的样品。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。10M醋酸铵和NucleaseFreeWater也可以室温保存。
注意事项：
需自备Tris平衡苯酚、氯仿和无水乙醇。
如果打算抽提到大片断的基因组DNA，则要尽量避免基因组DNA的物理性剪切。例如避免剧烈振荡含有基因组DNA的样品，可以用剪掉枪头尖的枪头吸取含有基因组DNA的样品。
不可过分干燥基因组DNA沉淀，否则会极难溶解。

使用说明：
1.样品收集
a)对于组织样品：
切下组织，并剪切成小块，置液氮中冻结，研碎或捣碎。
b)对于贴壁细胞：
胰酶消化后，PBS或生理盐水洗一次，1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
c)对于悬浮细胞：
1000-2000g离心1-2分钟，弃上清，收集细胞。
2.基因组DNA抽提
a)样品处理完毕后，每1毫升样品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混匀。
b)对于上述处理好的样品，每20毫克组织或106-107个细胞中加入500微升添加了蛋白酶K的样品裂解液，颠倒混匀数次，充分裂解组织或细胞。
c)50℃水浴消化过夜。
d)加入500微升Tris平衡苯酚抽提样品。
e)吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积Tris平衡酚再抽提一次。
f)吸出酚相及中间相(可以吸除少量靠近中间相的水相液体)，剩余的水相用等体积氯仿再抽提一次。
g)吸出约300微升上清液，加入60微升10M醋酸铵和600微升无水乙醇，颠倒数次混匀，此时可见DNA沉淀产生。
h)10,000g离心1分钟，弃上清。加入70%乙醇洗涤DNA沉淀两次。
i)尽量吸除残余的乙醇，待看不到明显的液体时，立即加入50-100微升NucleaseFreeWater溶解DNA。注意：不可过分干燥基因组DNA沉淀，否则会极难溶解。如果发现DNA沉淀难以溶解，可以在4℃用摇床缓慢摇动过夜，以溶解DNA沉淀。


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