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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
C-Flag plasmid(with CMV promoter)
- 库存:
382
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货C端Flag标签融合蛋白质粒供应在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货C端Flag标签融合蛋白质粒供应
品牌:百奥莱博
英文名:C-Flag plasmid(with CMV promoter)
产地:国产|进口
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3"端含有一个可以编码Flag标签的序列,因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-740 |
| c-Flag tag | 741-764 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 817-838 |
| SV40 polyA signal | 850-1233 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1371-1675 |
| bla promoter | 1700-1824 |
| SV40 promoter | 1844-2182 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2217-3008 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3009-3467 |
| pUC origin | 3596-4263 |
本质粒(5010bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
北京现货C端Flag标签融合蛋白质粒供应极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·STAT5凝胶迁移探针(10μM)
编号:YT259
英文名称:STAT5 Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT5 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的STAT5结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争,可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
STAT5 consensus oligo的序列如下:
5"-AGA TTT CTA GGA ATT CAA TCC-3"
3"-TCT AAA GAT CCT TAA GTT AGG-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·细菌冻存液(细菌保存液)
编号:YT033
英文名称:Bacterial Cryopreservation Solution
规格:50ml
本品可以用于各种常见细菌的冷冻保存。通常-20℃可以保存菌种一年,-80℃可以长期保存菌种。本细菌冻存液操作简单,只需把待保存的细菌沉淀用细菌冻存液重悬即可。如果每个菌种共保存250微升,一个包装的细菌冻存液可以保存200个细菌样品。
注意事项:
1. 细菌冻存液必须在超净台内使用,以避免杂菌污染。
2. 细菌冻存液必须和细菌混匀,否则细菌冻存液无法起到在低温冷冻条件下对细菌的保护作用。
3. 新鲜的对数期细菌冻存效果最好,但非对数期的或不是新鲜培养的细菌也可以用本细菌冻存液冷冻保存。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京现货C端Flag标签融合蛋白质粒供应关键词:C-Flag plasmid(with CMV promoter),C端Flag标签融合蛋白质粒,YT469
硫*(代"酸")铬* PNPG 7788-99-0
ARB13161 小鼠载脂蛋白B100(Apo-B100)代做ELISA实验 Mouse apoprotein b100,apo-b100 ELISA KIT
BL1094 RPMI Medium 1640(不含酚红、谷*酰胺、丙*(代"酮")酸*)
F030225 HRP标记兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG*HRP
2-羰基丁酸*盐 Chitosan 2013-26-5
ARB13520 鱼维生素D3(VD3)ELISAElisa定量检测
BL0144 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型 Rat tail tendon collagen type Ⅰ
BTN90101 大片段DNA分子量标准 Large DNAMETER
BTN60912 非酶RNA清除剂2.0 RNA Erasol 2.0
BL0776 Matrigel(基底胶)
ARB10922 人花生四烯酸(AA)尿液中含量检测 Human arachidonic acid,aa ELISA KIT
CYB161076 人丙种球蛋白
F010112 小鼠抗赭曲霉毒素抗体 Monoclonal Mouse Anti-ochratoxin
PP0201 Bradford法蛋白定量试剂盒
北京现货C端Flag标签融合蛋白质粒供应关键词:C-Flag plasmid(with CMV promoter),C端Flag标签融合蛋白质粒,YT469
·L-谷*酸氧化酶
编号:YT552
英文名称:L-Glutamate Oxidase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的L-谷*酸氧化酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化L-谷*酸生成H2O2O、*和α-酮戊二酸。
CAS:39346-34-4
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:L-glutamate + O2 + H2O = 2-oxoglutarate + NH3 + H2O2
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
·细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒
编号:YT129
英文名称:Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit
规格:50次
本试剂盒是一种采用经典的碘化丙啶染色方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。本试剂盒足够检测50个样品,每个样品的细胞数量可以为10-100万。
试剂盒组份:
染色缓冲液——————25ml
碘化丙啶染色液(20X)——————1.25ml
RNase A(50X)——————0.5ml
碘化丙啶(Propidium,简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片段在染色
细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。
本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化成单细胞状态,才可以进行检测。
注意事项:
1. 本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
2. 需自备PBS和70%乙醇,PBS。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司是克隆与表达产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购北京现货C端Flag标签融合蛋白质粒供应。
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文献和实验被遮蔽,从而干扰相互作用。因此,通常构建质粒的时候是N端、C端tagged同时分别构建,以备万一。 内源性蛋白的相互作用,主要依靠抗体IP,WB或者质谱分析。另外一条途径,是用外源性蛋白的coIP指代内源性蛋白,上文提到的tandem-tag技术的目的就是为了实现这种可能。它的核心是将外源性蛋白的过表达降低极低水平用于模拟体内环境。 实际上,在构建外源过表达体系的时候,通常可以得到一系列表达水平差异的稳定单克隆,可以通过进一步筛选获得外源与内源相加与原内源蛋白水平相当的细胞株(在细胞调控承受的范围
的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点,FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。 由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (货号#E022060 )可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag
【共享】在免疫沉淀IP:免疫荧光IF实验中关于Flag抗体的应用
表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。 由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(货号#E022060)可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。比如在免疫荧光IF的实验里,同时配合EarthOx的Dylight
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