胶原蛋白酶 来源于溶组织梭菌

属性

生物来源

Clostridium histolyticum

质量水平

200

形式

powder

比活

≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

适用性

suitable for release of physiologically active rat epididymal adipocytes

应用

diagnostic assay manufacturing

运输

wet ice

储存温度

−20°C

说明

一般描述

溶组织梭菌是一种可产生胶原酶的致病性梭菌。这是一种含有胶原酶、非特异性蛋白酶和梭菌蛋白酶的酶混合物。

应用

胶原酶可用于：

· 研究晚期糖基化终产物（AGE）的动脉组织的制备

· 与其他蛋白酶一起用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人脑、肺上皮和许多其他组织的解聚。

· 肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺的消化和非实质肝细胞的分离

· 从大鼠肝脏制备活的肝细胞以及从大鼠脂肪组织中分离脂肪细胞

生化/生理作用

每摩尔的胶原酶可被四克的钙原子所激活。它可被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N,N,N′,N′-四乙酸、β-巯基乙醇、谷胱甘肽，巯*乙酸和8-羟基*啉所抑制。胶原酶和中性蛋白酶在从组织中进行细胞的有效释放中都可起到重要作用。胶原酶可识别-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列，其中X大多数情况下是一种中性氨基酸。

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯*乙酸和8-羟基*啉抑制。

注意

根据所提供的信息，该产品在-20°C下可稳定保存一年。 在37℃、50℃和-20℃下FALGPA或蛋白酶的活性在30天内不会有损失。如果进行分装（10mg / mL）并快速冻存在-20℃，则粗胶原酶的溶液是可以稳定的。进一步的反复冻融会损坏溶液。 该产品在置于冰上时可保持100%活性超过7小时。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

溶液通常是在TESCA缓冲液（含有50mM TES、0.36mM氯化钙，37℃时pH 7.4）中按1-2 mg/mL进行制备。
该产品还含有梭菌蛋白酶、非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。