- ￥800
- wksubio
- WS9040W
- 国内
- 2025年11月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Plant Nitrate Nitrogen Kit/Plant Nitrate Content Kit
- CAS号：
WS9040W
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
96T
本试剂盒仅供科研使用
植物硝态氮试剂盒说明书
（货号：WS9040W 微板法 96 样）
一、产品简介：
硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可
作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，
而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在强碱条件下呈黄色，
该黄色物质在 410nm 处有最大光吸收，通过比色测定进而计算得植物硝态氮含量。
二、试剂盒的组成和配制：
【
注】：粉剂量在 mg 级别，使用前用手甩几次或者进行离心，打开直接加入要求的试剂即可。
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、天平、常温离心机、水浴锅、可调式移液器、浓硫酸。
四、植物硝态氮含量测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
称取约 0.1g，加入 1mL 蒸馏水，室温匀浆后，置于沸水浴中浸提 30min（期间不断晃
动），待冷却后于 25℃，12000rpm 离心 15min，取上清待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌/细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏水；
超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），
置于沸水浴中浸提 30min（期间不断晃动），待冷却后于 25℃，12000rpm 离心 15min，
取上清待测。
[注]:若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例提取。
③ 液体样本：直接检测；若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：
1 酶标仪预热 30min，调节波长至 410nm。
② 在 EP 管中依次加入：
试剂名称（
μL）
测定管
空白管（仅做一次）
样本
10
蒸馏水
10
试剂一
40
40
室温(25℃)反应 10min
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
粉剂×4 支
4℃保存
用前甩几下或 4℃离心使试剂落入试管底部，每
支再加 1.3mL 浓硫酸充分溶解，4℃避光保存 1
周。
试剂二
液体100mL×1瓶 4℃保存
标准品
自备
若重新做标曲，则用到该试剂。本试剂盒仅供科研使用
2
试剂二
(沿着管壁务必缓慢加入)
950
950
混匀，取 200μL 于 96 孔板中，410nm 处读取吸光值 A，
△A=A 测定管-A 空白管。
【注】试剂一和试剂二含有强酸强碱物质，需做好实验防护措施，谨慎操作！
五、结果计算：
1、标准曲线方程：y = 0.4165x + 0.003；x 为标准品浓度（
μg），y 为吸光值△A。
2、按样本质量计算：
硝态氮(NO3 -N) 含量 (μg/g 鲜重)=[(△A-0.003)÷ 0.4165]÷(W×V1÷V)
=240.1×(△A-0.003)÷W
3、按细胞数量计算：
硝态氮(NO3 -N) 含量 (μg/104 cell)=[(△A-0.003)÷ 0.4165]÷(500×V1÷V)
=0.48×(△A-0.003)
4、按照液体体积计算：
硝态氮(NO3 -N) 含量 (μg/mL)=[(△A-0.003)÷ 0.4165]÷V1=240.1×(△A-0.003)
V---加入提取液体积，1mL；
V1---样本的加样体积，10μL =0.01mL；
500---细胞数量，百万；
W---样本质量，g。
附：标准曲线制作过程：
1 制备标准品母液（500μg/mL）：称量 3.61mg 的硝*钾入 EP 管中，再加 1mL 蒸馏水
充分溶解（母液需在两天内用且-20℃保存）。
2 把母液稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 40, 80, 120, 160, 200. μg/mL。也可根据实
际样本来调整标准品浓度。
3 依据测定管的加样顺序操作，根据结果即可制作标准曲线。
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文献和实验相关实验
先用15-20℃水浸一天，催芽后湿播。一般每亩播种量3-3.5kg。越冬菠菜播种量较大，每亩4-10余kg。中国北方多采用平畦，南方多采用高畦栽培，撒播或条播。两片真叶后施速效氮肥1-2次。菠菜对氮、磷、钾的吸收比率为2:1:2.5，过多施用硝态氮肥，会使硝酸盐含量增高。整个生育期土壤湿度须保持田间持水量的70-80%。 为防止菠菜越冬死苗，须防寒保墒。中国北方在土壤封冻前采取设风障、灌“冻水”、盖厩肥等措施。为保证夏菠菜全苗和促进生长，中国长江流域和华南地区多采用搭棚遮挡，减少高温
技术资料植物硝态氮试剂盒/植物硝酸盐含量试剂盒,微板法
￥800
