Hoechst33258染色液

特别提示：包括Hoechst33258染色液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Hoechst33258染色液
产品货号：HR8324
产品规格：100T

Hoechst3328染色液可用于细胞凋亡检测，也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。
Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258能少许进入正常细胞膜，使其染上低蓝色，而凋亡细胞的膜通透性增强，因此进入凋亡细胞中的Hoechst 33258 比正常细胞的多，荧光强度要比正常细胞中要高，此外，凋亡细胞的染色体DNA的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA 结合，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst 33258排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
本Hoechst 33258染色液可直接用于活细胞或组织的细胞核染色，也可用于固定细胞或组织的细胞核染色。

储存条件：染液2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头 ● 流式细胞仪或荧光显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
● 由于细胞凋亡是一个快速和动态的过程，因此最好在染色后立即进行分析。
●染色浓度和时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
本染色试剂盒可用于细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙*固定后检测。以下以培养细胞的涂片的荧光显微镜检测为例，细胞染色也可不用多聚*醛固定，其他方法请参阅相关资料。

1．染色工作液的配制：
根据样品数用PBS 将Hoechst33258染色液20倍-50倍稀释，配制成染色工作液。
2．细胞涂片的制备：
贴壁细胞，可将盖玻片放于培养器皿中，让培养细胞长于玻片上，然后用药物诱导细胞凋亡后取出，用4%多聚*醛固定5min。也可其他方式培养后收集细胞制作涂片检测。
对于悬浮细胞，用药物诱导细胞凋亡后，1000-2000rpm离心5分钟收集细胞，用PBS洗2次，收集调整细胞数为1×105/ml，涂片或用离心涂片，用4%多聚*醛固定5min；
3．用PBS 洗涤涂片两次。
4．加适量染色工作液于涂片上，室温避光染色5-20分钟。
5．用PBS 洗涤涂片。
6．用荧光显微镜检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。

结果分析：
Hoechst 33258染色后，置于荧光显微镜下，选用340-350nm的激发光观察：正常细胞的细胞核呈弥散均匀蓝色荧光，凋亡细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状蓝色荧光，颜色有些发白。如果见到3个或3个以上的DNA荧光碎片被认为是凋亡细胞。

除了Hoechst33258染色液,，我公司还供应以下相关产品：
 

货号	名称	规格
YT914	中性红染色液	100ml
SNM337	无毒环保透明剂	500ml
KFS147	活细胞核酸染料-绿菁SYTO	500μL
KFS254	Hoechst 33342染色液	10ml|50ml
HR8322	苏木素染色液	50ml
HR8362	溶酶体染色试剂盒(绿色荧光)-L02	125T/250T
HR8365	溶酶体染色试剂盒(黄色/蓝色荧光)-L05	125T/250T
HR8575	细胞质染色试剂盒-C03	500T
BTN160259	Heidenhain苏*精染色液	250mL
BTN160278	Stirling结晶紫溶液	250mL
GL0328	细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒	100T
GL0342	甲**蓝染色液(1%,硼*盐法)	100ml
GL0350	中性红染色液(0.5%)	100ml
GL0352	中性红乙醇染色液(0.1%)	100ml
GL0424	Thomas磷钼酸苏木素染色液	2×100ml
GL2579	电镜脱钙液	100ml|500ml
GL0688	*水溶液(0.1%)	500ml
GL0794	神经HRP示踪显色液(TMB法)	50T
GL0804	油红O异丙*饱和液	100ml
GL0857	抗酸染色液(金胺O荧光法)	4×100ml
GL2663	芽孢晶体染色液	50ml
GL0909	钙盐染色液(茜素红S法)	2×50ml
GL0976	茜素红S染色液(0.2%)	100ml
GL2262	茜素红S染色液(1%)	100ml
GL2713	成骨细胞矿化结节染色液(茜素红S法)	2×50ml
GL0926	磷钨酸负染色液(3%)	100ml
GL0935	固绿染色液(0.5%)	100ml