Caspase 4 活性检测试剂盒

特别提示：包括Caspase 4 活性检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Caspase 4 活性检测试剂盒
英文名称：Caspase 4 Activity Assay Kit
产品货号：YT141
产品规格：20次|100次

本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 4酶活性或纯化的caspase 4酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测20个样品。

Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 4有时被写作caspase-4或caspase 4，可以和Apaf-1相互作用并参与细胞色素c导致的caspase 3激活。Caspase 4也可以和caspase 14相互作用。

本Caspase 4活性检测试剂盒是基于caspase 4可以催化底物Ac-LEVD-pNA(acetyl-Leu-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测caspase 4的活性。pNA在405nm附近有强吸收。

试剂盒中提供了caspase 4催化产生的黄色产物pNA，可以作为定量caspase 4酶活性的标准品。

试剂盒组分：
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-LEVD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl

注意事项：
1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405，如有困难可以测定A400。
2. Ac-LEVD-pNA需尽量避免反复冻融，请注意适当分装。
3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)，可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度，以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
4. pNA(中文名为4-硝基**)有毒，请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用，即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。

储存条件：-20℃。

除了Caspase 4 活性检测试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒
货号：BTN140634
规格：500次
MTS是一种新型甲臜化合物，和MTT同属四唑氮衍生物。MTS能被活细胞里的线粒体脱氢酶降解而产生棕黄色水溶性的甲臜，通过测定甲臜的光谱吸收，进而可以测定细胞的增殖情况。原理如下：


产品特点：
1．本试剂盒是单溶液式细胞增殖与细胞毒性检测试剂，主要成分包含MTS和一个电子耦合试剂，溶液的稳定性强，反应的灵敏度高。
2．操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时，无需洗涤或收获细胞，免去溶解步骤。
3．无放射性。不需要配制液闪混合物，也不需要处理废弃物。
4．与MTT相比，使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。
5．操作灵活，与MTT不同，平板读数后可放回温箱继续孵育，使颜色进一步生成。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期半年。

使用效果：
96孔板中加入细胞100μL/孔(约1×104)，37℃，5% CO2细胞培养箱培养24小时，加入适当浓度的受试化合物。培养箱中孵育适当时间，每孔中加入10μL的MTS细胞增殖及毒性检测溶液。37℃孵育1-4小时。490nm波长检测光密度。

备忘录：
1．细胞的存活率：将各测试孔的OD值减去本底OD值(完全培养基加MTS细胞增殖及毒性检测溶液，无细胞)或空白药物孔OD值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTS细胞增殖及毒性检测溶液，无细胞)，各重复孔的OD值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。
细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
2．求出T/C = 50%时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

名称：DNA ladder 600
货号：SNM521
规格：60T

名称：TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(荧光及显色法，细胞样本)
货号：SNM531
规格：50T|20T

名称：Annexin V-APC/PI双染双染细胞凋亡检测试剂盒
货号：KFS191
规格：20T|100T|50T
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素APC 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V- APC 与PI 匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-APC/PI 避光保存及使用。
3. PI 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

名称：体内巨噬细胞清除剂(阴离子氯氟松)
货号：SY0487
规格：2ml
本品是目前市场上最理想的用于高效巨噬细胞耗竭的氯磷酸二钠脂质体。相比中性氯氟松，阴离子氯氟松具有更高的清除效率。静脉注射0.2ml，24hr后脾脏（红髓巨噬细胞）中巨噬细胞清除率大于90%。分子包被在LUV脂质体胶囊中，具有活性高、稳定性高及使用方便等特点。本品中装载的氯膦*二钠是一种特异的杀伤巨噬细胞的药物，可以通过诱导巨噬细胞凋亡来剔除组织中的巨噬细胞。在长期保存后仍能保持均匀的、自由流动状态，不粘稠、易于注射。该产品为无菌生产。

溶液（Solution）：磷酸缓冲液（20mM磷酸钠，10%蔗糖），pH 7.0-7.5
浓度：7 mg/ml
纯度：>90%
脂类成分（Lipid composition）：磷脂酰甘油、磷脂酰胆碱和胆固醇
储存条件：4℃
结构式


名称：CCCP细胞凋亡诱导剂(50mM)
货号：QN1291
规格：100ul
CCCP是一种质子载体(H+ ionophore)，强效的线粒体氧化磷酸化解偶联剂，促使线粒体内膜对H+产生通透性，导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失，诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜，抑制光合作用;CCCP还可抑制内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运，高亲和力结合细胞色素C氧化酶。

CAS号：555-60-2
分子式：C9H5ClN4
分子量：204.62
储存条件：-20℃保存
纯度：≥97% (TLC)

CCCP还具有其他功能：
1)在牛蛙交感神经方面的实验表明，CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放;
2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性;
3)对细胞内钙水平的各种调节效应;
4)抑制脂肝酶的分泌;
5)部分抑制pH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。

本品是溶于DMSO的CCCP溶液，浓度为50mM，体积为100μl(相当于1mg的总量)，常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡，并配合线粒体膜电位检测探针JC-10(货号：J8050)来进行相关研究。

使用方法：
1)收到本品(CCCP，50 mM)后按照10-50µl的小量分装，冻存在-20℃，避免反复冻融。
2)推荐工作浓度为10-100µM，初次实验可按照1000×稀释起始浓度(如1µl起始母液加入1ml细胞培养液)进行凋亡诱导20min，随后进行JC-1或者JC-10线粒体膜电位丧失检测，呈绿色荧光。

名称：CCK-8反应终止液
货号：HR8313
规格：500T/1000T
反应终止液用于在做CCK-8实验时，如果暂时不测定O.D值，打算以后测定或为了避免每次准备标准曲线，可以加入Stop Solution，并遮盖培养板避光保存在0-5℃条件下，在7天内测定吸光度即可。

储存条件：2-8℃避光保存。
注意：
1．长期存放请分装后-20℃避光保存。
2．避免反复冻融。
3．冻存后溶解时注意重新混匀。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

使用方法：
CCK-8实验结束后，每孔加入10μl反应终止液，混匀后，将培养板避光保存在0-5℃条件下。7天内测定吸光度。
非96孔板培养，加入培养基用量的10%体积的反应终止液即可。