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100
- 英文名:
SDS-PAGE kit
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详询
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
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Store at -4℃
- 规格:
20
英文名称:SDS-PAGE kit
中文名称:SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
规格价格:40-60块
说 明 书:请向客服索取
保存条件:Store at -4℃
产品介绍:SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
产品简介
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒规格:可制40-60块凝胶
保存: 10% SDS和TEMED (避光) 室温保存。30%Acr混合液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8)4°C保存、APS配制成10%溶液后,分装成小管-20°C保存,通常半年内有效。
本公司生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Parparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。
本试剂盒可配制不同常规、不同聚合度的PAGE胶约40-60块。
包装清单
| 30%Acr混合液 | 100ml |
|
1.5mol/L Tris(pH8.8)
|
100ml
|
|
1.0mol/L Tris(pH6.8)
|
30ml |
|
10%APS
|
5ml
|
|
10% SDS
|
5ml
|
|
TEMED
|
0.5ml
|
|
说明书
|
一份
|
保存: 10% SDS和TEMED (避光) 室温保存。30%Acr混合液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8)4°C保存、APS配制成10%溶液后,分装成小管-20°C保存,通常半年内有效。
使用说明:
1. 10%APS为5ml,应分装置-20°C保存,通常半年内有效。
2. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
|
SDS-PAGE分离胶浓度
|
最佳分离范围
|
|
6%胶
|
57-212kD
|
|
8%胶
|
36-94kD
|
|
10%胶
|
20-80kD
|
|
12%胶
|
12-60kD
|
|
15%胶
|
10-43kD
|
配制6%的PAGE分离胶
|
成分
|
所需各成分的体积(毫升)
|
|||||
|
凝胶体积
|
5 | 10 | 15 |
20
|
25
|
30
|
|
蒸馏水
|
2.6
|
5.3
|
7.9 |
10.6
|
13.2
|
15.9
|
|
30%Acr混合液
|
1.0
|
2.0
|
3.0 |
4.0
|
5
|
6.0
|
|
1.5mol/L Tris(pH8.8)
|
1.3
|
2.5
|
3.8
|
5.0
|
6.3
|
7.5
|
|
10%SDS
|
0.05
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25 |
0.3
|
|
10%APS
|
0.05 |
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
TEMED
|
0.004
|
0.008
|
0.012
|
0.016
|
0.02
|
0.024
|
配制8%的PAGE分离胶
|
成分
|
所需各成分的体积(毫升)
|
|||||
|
凝胶体积
|
5
|
10
|
15
|
20 |
25
|
30
|
|
蒸馏水
|
2.3
|
4.6
|
6.9 | 9.3 |
11.5
|
13.9
|
|
30%Acr混合液
|
1.3
|
2.7
|
4.0
|
5.3
|
6.7
|
8.0
|
|
1.5mol/L Tris(pH8.8)
|
1.3 |
2.5
|
3.8
|
5.0 |
6.3
|
7.5
|
|
10%SDS
|
0.05
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
10%APS
|
0.05
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
TEMED
|
0.003
|
0.006
|
0.009
|
0.012
|
0.015
|
0.018
|
配制10%的PAGE分离胶
|
成分
|
所需各成分的体积(毫升)
|
|||||
|
凝胶体积
|
5
|
10
|
15 | 20 |
25
|
30
|
|
蒸馏水
|
1.9 |
4.0
|
5.9 | 7.9 |
9.9
|
11.9
|
|
30%Acr混合液
|
1.7
|
3.3
|
5.0
|
6.7
|
8.3
|
10.0
|
|
1.5mol/L Tris(pH8.8)
|
1.3
|
2.5 |
3.8
|
5.0
|
6.3
|
7.5
|
|
10%SDS
|
0.05 |
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
10%APS
|
0.05
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25 |
0.3
|
|
TEMED
|
0.002
|
0.004 |
0.006
|
0.008
|
0.01
|
0.012
|
配制12%的PAGE分离胶
|
成分
|
所需各成分的体积(毫升)
|
|||||
|
凝胶体积
|
5
|
10
|
15
|
20 | 25 |
30
|
|
蒸馏水
|
1.6 | 3.3 |
4.9
|
6.6 |
8.2
|
9.9
|
|
30%Acr混合液
|
2.0
|
4.0 |
6.0
|
8.0
|
10.0
|
12.0
|
|
1.5mol/L Tris(pH8.8)
|
1.3 |
2.5
|
3.8
|
5.0
|
6.3
|
7.5
|
|
10%SDS
|
0.05
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
10%APS
|
0.05
|
0.1
|
0.15 |
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
TEMED
|
0.002
|
0.004
|
0.006
|
0.008
|
0.01
|
0.012
|
配制15%的PAGE分离胶
|
成分
|
所需各成分的体积(毫升)
|
|||||
|
凝胶体积
|
5
|
10
|
15
|
20 |
25
|
30
|
|
蒸馏水
|
1.1
|
2.3 | 3.4 | 4.6 |
5.7
|
6.9 |
|
30%Acr混合液
|
2.5
|
5.0
|
7.5 |
10.0
|
12.5
|
15.0
|
|
1.5mol/L Tris(pH8.8)
|
1.3
|
2.5
|
3.8 |
5.0
|
6.3
|
7.5 |
|
10%SDS
|
0.05
|
0.1
|
0.15 |
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
10%APS
|
0.05
|
0.1
|
0.15
|
0.2
|
0.25
|
0.3
|
|
TEMED
|
0.002
|
0.004
|
0.006
|
0.008
|
0.001
|
0.012
|
3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)
配制不同体积的浓缩胶
|
成分
|
所需各成分的体积(毫升)
|
|||||
|
凝胶体积
|
2
|
3
|
4
|
5
|
6
|
8
|
|
蒸馏水
|
1.4
|
2.1
|
2.7
|
3.4
|
4.1
|
5.5
|
|
30%Acr混合液
|
0.33
|
0.5
|
0.67
|
0.83
|
1.0
|
1.3
|
|
1.0mol/L Tris(pH6.8)
|
0.25
|
0.38
|
0.5
|
0.63
|
0.75
|
1.0
|
|
10%SDS
|
0.02
|
0.03
|
0.04
|
0.05
|
0.06
|
0.08
|
|
10%APS
|
0.02
|
0.03
|
0.04
|
0.05
|
0.06
|
0.08
|
|
TEMED
|
0.002
|
0.003
|
0.004
|
0.005
|
0.006
|
0.008
|
注意事项
10%APS的水溶液不稳定,每次取用后应立即放回冰箱,尽量减少室温存放时间,以防失效。如发现凝胶聚合不好,应考虑丢弃使用过的10%APS,更换新配制的10%APS。
另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切,在其它条件不变的情况下,可通过改变TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。操作中,特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
未聚合的Acr有毒,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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