lentiMPH v2哺乳编辑质粒

哺乳动物细胞基因/基因组编辑

基因编辑技术的飞速发展, 特别是近年来 CRISPR 技术的广泛应用，使得人类拥有了前所未有的改变和修饰基因组的能力。CRISPR 技术来源于细菌本身对抗噬菌体的「免疫系统」，这项技术利用单链引导 RNA(sgRNA) 和 Cas9 蛋白，可以在体内和体外简单、迅速、低成本实现基因编辑。利用 CRISPR 技术不仅可以对编码基因进行有效编辑和基因组的大规模筛选，而且还可以结合 NGS 对非编码 RNA（ncRNA）进行功能研究。CRISPR 技术已经广泛应用于全球各个实验室，几乎可以对所有细胞

基因编辑再次升级！领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具，可安全高效进行体内基因编辑

293T 细胞。 图片来源：Cell VLP 的持续改善以优化其递送性能 虽然上述实验证明了 v1 BE-VLPs 可以在体外细胞系中实现高效递送和精准编辑，但这些常用的测试细胞系尤其容易被基因编辑，并且缺乏治疗相关性。考虑到只有在病毒颗粒成熟后才会发挥切割功能并释放出 ABE8e-RNP。所以他们认为切割效率可能会成为 BE-VLP 编辑的瓶颈。 在第二代工程编辑的 BE-eVLPs（v2 BE-eVLPs）中，他们对连接肽体系进行了优化。研究人员筛选了 4 个已知被 MMLV 蛋白酶以不同效率切割

GENETICS：用于检测哺乳动物细胞中 DNA-蛋白质交联质粒修复的简单、快速的定量分析

该方法的目的是提供灵活，快速和定量的技术来检测哺乳动物细胞系中DNA-蛋白质交联（DPC）修复的动力学。该测定不是全局测定异种生物诱导的或自发的染色体DPC去除的去除，而是检查在质粒DNA底物内的一个位点处特异性引入的均匀的，化学定义的损伤的修复。这种方法避免了放射性物质的使用，并且不依赖昂贵的或高度专业化的技术。相反，它依赖于标准的重组DNA程序和广泛可用的实时定量聚合酶链式反应（qPCR）仪器。考虑到所用策略的固有灵活性，可以改变交联蛋白的大小以及化学连接的性质和连接位点的精确 DNA