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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负80度
- 保质期:
3年
- 英文名:
pTrc-Taq聚合酶基因质粒
- 库存:
100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
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文献和实验137 - pCDNA3 质粒4μl , P1 , P2 各015μmol/ L , MgCl2 2mmol/ L , dNTP014mmol/ L , Taq 5U ; hIgG1Fc 片段的PCR 扩增体系:含人hIgG1Fc 的PGEM - T 质粒4μl , P3 、P4 各014μmol/ L , MgCl2 2mmol/ L , dNTP014mmol/ L ,Taq 5U ; HBV DNA 多聚酶基因的PCR 扩增体系, 第一轮: HBV DNA 模板 4μl , P5 、P6 各0125μmol
验对保真度要求较高,在选择 DNA 聚合酶的时候就需要使用高保真酶,如 Pfu、KOD、Primerstar、Phanta 等。前三者都属于第一代高保真酶,已在市场中广泛使用。诺唯赞科研团队的大力改造生产的 Phanta 系列的高保真酶,保真度达到了 Taq 酶的 50 倍,扩增性能、扩增长度、产量、模板适应性都显著提升。Phanta Max 保真度是 Taq 酶的 53 倍,Pfu 的 6 倍,对于质粒等简单模板有效扩增长度可达 40kb,cDNA 有效扩增长度可达 10kb,基因组有效扩增
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
双酶切后,嵌入表达载体pTrc-99B的NcoI和HindIII两个酶切位点间的切口内。得到的LeuRS 6个变种酶基因的正确性用DNA测序证实。 2. LeuRS及其变种酶基因的表达和纯化 1) 将含有LeuRS及其六个变种酶LeuRS-E292K,LeuRS-E292F,LeuRS-E292S,LeuRS-E292D,LeuRS-E292Q,LeuRS-E292A的基因的重组质粒转化到在大肠杆菌菌株TG1中,挑选含有正确质粒的转化子至5 mL氨节
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