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上海吉凯基因
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相对定量蛋白质组学
1.服务简介:非标记定量蛋白质组学(Label-free)技术
2.服务内容:大规模定量比较样本中的蛋白质表达水平。
3.适用范围:细胞、组织、胶、血清血浆、体液、亚细胞结构、FFPE等。
4.服务流程:蛋白质抽提、酶切、质谱分析、数据库比对、生物信息学分析以及多层次的质量控制。
上海吉凯基因医学科技股份有限公司
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文献和实验非标记定量蛋白质组学 (Label Free)近年来成为重要的质谱定量方法,按照其原理进行分类,可以分为两类。Spectrum counts类的非标记定量方法,发展比较早,也形成了多种算法进行定量,但是主要的原理都是根据MS2的鉴定结果作为定量的基础,各种方法的差别在于后期算法在大规模数据上的修正。第二种非标记定量方法的原理是以MS1为基础,计算每个肽段信号在LCMS质谱上的积分,目前Label Free主要的数据分析方法是利用Maxquant软件,根据一级质谱相关的肽段峰强度、峰面积、液相
基于MS强度或计数的数据依赖法非标记定量蛋白质组学的蛋白质互作分析(一)
本期要介绍到的是基于MS强度或计数的数据依赖法非标记定量蛋白质组学的蛋白质互作分析。 在试验中使用不同的同位素标记(某些情况下等压标记)是一种行之有效的肽和蛋白质定量方法。通常,分析之前,标记样品和未标记样品是混合在一起的,这时可以通过测量相应的峰值强度来直接确定化合物比率。标记大致可以分成这些共价附着在肽上的标记,包括同位素编码的亲和标签、ICAT或iTRAQ、通过酶反应合成(例如通过胰蛋白酶合成18O)或通过代谢合成(例如在细胞培养中用氨基酸标记稳定同位素)、SILAC等。在蛋白质互作
行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。 iTRAQ技术特点: 不同样本标记之后混样,统一处理上机,减少了分别上机造成的实验误差,并利用同位素标签的丰度来检测,定量更准确,重复性更好; 由于需要标记试剂标记,因此成本相对较高; 通量高,在一次实验中最多可同时比较8个样品; 利用基于同一个参考样品的办法,可以进行多于8个样品的定量比较; iTRAQ的覆盖度高、灵敏度高。 Label-Free定量蛋白质组学分析 Label-Free定量,即非标记的定量蛋白质组学










