5×蛋白上样缓冲液(含DTT)

特别提示：包括5×蛋白上样缓冲液(含DTT)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：5×蛋白上样缓冲液(含DTT)
英文名称：SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)
产品货号：QN1084
产品规格：10ml

本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚*烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，DTT，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位)，电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。

使用说明：
1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。

注意事项：
1、聚*烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

除了5×蛋白上样缓冲液(含DTT),，我公司还供应以下相关产品：



名称：真菌总蛋白质微量提取试剂盒
货号：BTN81202
规格：50次
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法，适合于各种形态的各种酵母材料。

产品特点：
1．破壁效率高，能达到80-90%。
2．可以处理各种酵母样品。
3．操作简单，得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B成分一	50ml
溶液B成分二	1.5g
玻璃珠，400μm	5g
说明书	1份

储存条件：常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
准备工作：将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中，充分摇晃使之全部溶解，成为溶液B，然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。

1．将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中，30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5～2.0。
2．把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中，混匀。
3．4℃，5000g离心5分钟沉淀酵母细胞，吸出上清液。
4．用30μL溶液B悬浮酵母细胞，并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
5．100℃下保温3分钟，使蛋白酶失活，样品存放于-20℃。
6．加入0.1g的玻璃珠。
7．在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8．加入70μl溶液B，稍加振荡，置100℃保温1分钟。
9．取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳。