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- 2026年01月07日
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低温
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臻诺生物
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5 mg
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文献和实验实验目的： 通过 DIR 染料标记外泌体，通过尾静脉注射 DIR-labeled Exosome，24 小时内观察外泌体在体内的代谢情况。 实验材料： DIR- Exosome，裸鼠； DIR-Exosome：染料终浓度 1uM，外泌体 200ug，体积 200ul； Exosome 来自 HEK293 无血清培养基（Umibio，UR51102）条件下获得，通过外泌体提取试剂盒提取（Umibio，UR52121）。 实验内容： 1、通过尾静脉注射 200 ug/支的 DIR- Exosome
/mL。 f、基于以下两个原因，建议准备2倍于正常共孵育实验所需外泌体的量来进行染料标记。一是使用过量染料进行标记，外泌体的染色效率仍无法达到 100%；二是去除游离染料的过程中存在外泌体回收率的损失。 21、关于外泌体荧光染料（DIR）相关实验注意事项 a、活体成像对外泌体浓度要求较高，建议用于染料标记的外泌体原始浓度达到 0.5~1.5μg/μL，外泌体浓度过低实验失败风险较高。 b、外泌体染色步骤中去除游离染料的第 4、5 步必不可少，以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌
的强度：PE > APC > FITC > PerCP。 3. 多色流式细胞检测中荧光染料荧光图案的选择原则 1) 根据机器配置选择最亮的荧光染料 了解你使用的流式细胞仪的性能，大多数流式细胞仪有两个或者多个激光器，有五种波长可供选择：紫外（355 nm）、紫色（405 nm）、蓝色（488 nm）、黄色（561 nm）和红色（640 nm）。除了激光器，具体的虑光片和检测器也决定了你的配置可同时检测多少种颜色。 多色标记荧光染料尽量选用不同激光激发的染料。荧光染料
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