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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 供应商:
臻诺生物
- 规格:
50 块胶
KGP113-red8% SDS-PAGE 预混胶(红色浓缩胶系列,8% 分离胶)|凯基 KeyGEN
✅ 基础参数
- 货号:KGP113-red8%
- 产品名称:SDS-PAGE 预混胶(红色浓缩胶系列,8% 分离胶)
- 胶浓度:下层分离胶 8%;上层红色彩色浓缩胶
- 蛋白分离范围:30–90 kDa,适合大分子量蛋白,如 α-Tubulin(55kDa),完美适配前面 WB 内参实验
- 规格:可配制约 50 块 1.0 mm 迷你胶(Mini 胶)
- 试剂盒组分
- 8% 分离胶预混液:300 mL
- 红色浓缩胶预混液:150 mL
- (AP):1 g
- 改良促凝剂
- 储存条件:2–8℃避光保存,避免冷冻;促凝剂长期可 - 20℃避光存放
- 认证:RUO 科研专用,不可临床诊断
- 适用:SDS-PAGE 蛋白电泳、WB 上样分离
🧪 产品特点
- 红色浓缩胶:上层胶带红色色素,灌胶后肉眼清晰区分浓缩胶 / 分离胶界面,加样孔轮廓一目了然,减少灌胶失误
- 预混配方、Bis、Tris、SDS;仅需混匀 + 添加促凝剂,省去多步称量配制,节省配胶时间
- 凝胶重复性稳定,条带锐利,适合 Western Blot 蛋白分离
- 配套常规 Tris - 甘氨酸电泳缓冲液,实验室常规电泳槽直接使用
- 可和凯基 WB 抗体整套搭配(前面 α-Tubulin 一抗、羊抗兔 HRP 二抗)
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文献和实验处理好的蛋白质样品,左侧第一个孔道为蛋白Marker,依次在各个孔道中加入样品,并做好顺序记录。安装好系统后,4?C、220V电压下开始电泳,使蛋白质样品首先在浓缩胶中压缩成一条细带,然后继续电泳,直至样品指示剂-溴酚蓝到达玻璃板的下缘,关掉电源,取下制胶板,用刀片或镊子将两块玻璃板轻轻撬开,用单面刀片将浓缩胶切掉,将分离胶左上方切掉一个小角以标记样品顺序。(由于分离胶非常容易断裂,因此在移动前手需要保持湿润,也可在胶上滴加一些三蒸水。) 3 Western Blot 原理
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
调至50mA,待染料前沿迁移至距硅橡胶框底边1~1.5cm处,停止电泳,一般需5~6h。 2.不连续系统 在电极槽中倒入pH8.3Tris-HCl电级缓冲液,内含0.1%SDS即可进行电泳。在制备浓缩胶后,不能进行预电泳,因预电泳会破坏pH环境,如需要电泳只能在分离胶聚合后,并用分离胶缓冲液进行。预电泳后将分离胶面冲洗干净,然后才能制备浓缩胶。电泳条件也不同于连续SDS-PAGE。开始时电流为10mA左右,待样品进入分离胶后,改为20~30mA,当染料前沿距硅橡胶框底边1.5cm时,停止电泳,关闭
非变性聚丙烯酰胺凝胶和变性sds-page电泳在操作上基本上是相同的,只是非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制和电泳缓冲液中不能含有变性剂如SDS等。一般蛋白进行非变性凝胶电泳要先分清是碱性还是酸性蛋白。分离碱性蛋白时候,要利用低pH凝胶系统,分离酸性蛋白时候,要利用高pH凝胶系统。酸性蛋白通常在非变性凝胶电泳中采用的pH是8.8的缓冲系统,蛋白会带负电荷,蛋白会相阳极移动;而碱性蛋白通常电泳是在微酸性环境下进行,蛋白带正电荷,这时候需要将阴极和阳极倒置才可以电泳。分离酸性蛋白工作液配制1. 40%胶
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