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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 供应商:
臻诺生物
- 规格:
50 tests
KGA346 TRA-1-81 免疫荧光试剂盒(IF,凯基 KeyGEN)
科研用途,不可用于临床诊断规格:50 tests
✅ 产品简介
- 适用样本:细胞爬片、干细胞克隆(主要是人源 iPSC/ESC)
- 荧光二抗:FITC 绿色荧光(Ex 495 nm / Em 519 nm),配套 DAPI 染核
- 特点:直接检测细胞膜表面抗原,适合干细胞克隆免疫荧光鉴定;与 Oct4、SSEA4 搭配作为多能性金标准组合
🧬 靶标说明
染色判读:细胞膜绿色 FITC 荧光,DAPI 蓝色细胞核,双信号叠加判定细胞维持多能干性。注意:小鼠 ES 细胞不表达 TRA-1-81,只用于人源多能干细胞。
📦 试剂盒组分(标准套装,50tests)
- TRA-1-81 一抗(50 μl)
- FITC 标记羊抗兔 IgG 二抗(50 μl,避光保存)
- 20×DAPI 核染液(250 μl)
- 封闭液(5% BSA)
- 免疫荧光洗涤液(PBS-T)
- 抗荧光淬灭封片剂
- 说明书凯基
📝 简要 IF 操作流程(干细胞克隆爬片)
- 固定:室温固定 15 min,PBS-T 洗涤
- 通透:0.1% Triton X-100 室温通透 10 min,PBS-T 洗涤
- 封闭:封闭液室温封闭 30 min,甩掉不洗
- 一抗孵育:滴加 TRA-1-81 一抗,4℃过夜;PBS-T 洗涤 3×5 min
- 二抗孵育:FITC 荧光二抗,全程避光,室温 1 h;PBS-T 洗涤
- DAPI 染核:避光 5 min,PBS 轻洗
- 抗淬灭封片,指甲油封边
- 荧光显微镜观察:细胞膜绿色荧光为 TRA-1-81 阳性
⚠️ 关键注意事项
- 全程避光,FITC 荧光二抗、DAPI 极易淬灭;封片后尽快拍照,切片 4℃避光保存
- TRA-1-81 是膜抗原,通透强度不要过高,避免膜抗原破坏
- 对照设置:阳性对照(人 iPSC 克隆);阴性对照(不加一抗,或已分化人细胞)
- 储存:TRA-1-81 一抗 2~8℃可保存 6 个月,长期分装放 - 20℃,避免反复冻融;荧光二抗、DAPI 2~8℃避光保存凯基
- 仅限科研,不能用于临床诊断
📌 适用场景
- 人 iPSC/ESC 多能性鉴定、干细胞克隆质控
- 干细胞诱导分化前干性验证
- 可搭配 KGA344 Oct-4 IF、KGA342 SSEA-1/3/4 IF 组成多能性全套鉴定
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