蛋白质银染检测试剂盒

低背景的蛋白质银染方法

我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 timesSensitive 0.02% Na2S2O3 1 minRinse Double distilled H2O 1 min, 3 timesSilver 0.5% AgNO3, 0.075

PAGE胶上蛋白质的银染方法

PAGE胶上蛋白质的银染方法有数百种，其原理相似，具体步骤各不相同。银染为蛋白质的非特异性染色，呈“爆炸性”反应模式，用于蛋白定量时准确性差，但其敏感度高、简便易行，仍被广泛应用。下面列举的这三种方法为常用的双向电泳凝胶染色法，可与质谱兼容。其中方法1敏感性最高，方法3背景最低、对比度好。 1. Blam silver staining protocol (Modified) 程序 溶液 时间

基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备

胶样质谱鉴定过程中，多肽的回收是一个问题。如下图所示，将胶样中同样的20 ng兔骨骼肌肌动蛋白用不同的染色法进行染色：常规银染色（无戊二醛）与锌-咪唑锌阴性染色法。染色后，用胰蛋白酶在凝胶中对蛋白质进行消化，磁珠法对样品进行浓缩，用MALDI-MS进行蛋白质谱鉴定。结果发现，与阴性染色的蛋白质相比，蛋白质的银染色导致胰蛋白酶肽的回收率降低（比较图中左右两边肽的S / N比率）。该影响可通过去除蛋白质染色过程中银染试剂的方式消除。 图注：20 ng (500 fmol)兔骨骼肌肌动蛋白经胰酶