平末端DNA加A试剂盒

平末端DNA加A试剂盒

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月13日
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      194

    • 英文名

      dA Tailing Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      低温运输,-20℃

    • 规格

      50次

    特别提示:包括平末端DNA加A试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:平末端DNA加A试剂盒
    英文名称:dA Tailing Kit
    产品货号:BTN60105
    产品规格:50次

    本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dATP 存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴,使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下:
    加A试剂盒流程图

    产品特点:
    1. 简单,2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
    2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
    3.产物可以直接用于与T载体的连接。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    Taq DNA polymerase(5U/μL) 50μl
    2×Tailing Buffer 1.25ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:

    一:反应前纯化处理:
    用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/*仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加A反应时,切除掉加上的A尾巴,干扰反应。可以采取胶回收和酚/*仿抽提法等常规方法纯化,最后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。
    二:加A反应
    在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
    回收的DNA片段 0.2-2ug
    2×dA Tailing Buffer 25μL
    Taq DNA polymerase(5U/μL) 1μL
    补水到 50μL
    72℃保温2小时

    三:反应后处理
    加A反应后,Taq DNA pol

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