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- 详细信息
- 文献和实验
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120
- 英文名:
N-Flag plasmid(with CMV promoter)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1μg
特别提示:包括N端Flag标签融合蛋白质粒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:N端Flag标签融合蛋白质粒
英文名称:N-Flag plasmid(with CMV promoter)
产品货号:YT479
产品规格:1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5"端含有一个可以编码Flag标签的序列,因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Flag tag | 679-702 |
| multiple cloning site | 705-778 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 821-842 |
| SV40 polyA signal | 854-1237 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1375-1681 |
| bla promoter | 1706-1830 |
| SV40 promoter | 1850-2188 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2223-3014 |
| HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3015-3473 |
| pUC origin | 3602-4269 |
本质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
我公司销售的N端Flag标签融合蛋白质粒现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验也可以,这样用一个启动子CMV同时表达两个蛋白,而不是融合蛋白。 liuyicheng84427 VEGF应该加在GFP的N端还是C端? lmnsmu VEGF加在GFP的N端或C端均可以,而且有一些载体如pEGFP-N1或pEGFP-C1在N端或C端已经有GFP的序列,只需将你的目的基因序列插入到MCS区即可融合表达。 naj2007 多谢大家! hiqihong
的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点,FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。 由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (货号#E022060 )可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag
【共享】在免疫沉淀IP:免疫荧光IF实验中关于Flag抗体的应用
表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。 由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(货号#E022060)可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。比如在免疫荧光IF的实验里,同时配合EarthOx的Dylight
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