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- CRL-12284
- 2025年12月05日
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复祥生物
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常温干冰
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良好
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0
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大量
CRL-12284 PT67 逆转录酶病毒包装细胞，ATCC 细胞|细胞系|细胞株|肿瘤细胞|细胞,细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和最优培养条件
| CRL-12284™ | Price: | $438.00 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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文献和实验tjmedwnn：确定G418最佳筛选浓度用什么细胞？大家好，我现在做实验，用G418抗性的逆转录病毒包装系统收获病毒液做稳定转染，第一步需要用PT67细胞包装收获病毒液，说明书上说质粒转入PT67细胞后要用G418做筛选，之前需要用不同浓度的G418做一个最佳筛选浓度试验。请教大家，用来做确定最佳浓度试验的PT67细胞是用未经过任何处理的PT67细胞呢还是用已经转染过的PT67细胞？？另外收获病毒液后我需要用其转染干细胞，转染后同样需要用G418筛选，问题同上，首先做确定最佳G418浓度试验
问：构建逆转录病毒为载体的DNA（质粒），阳离子脂质体2000（过期的），转染病毒包装细胞pt67，G418筛选，在换液和传代过程中均会有细胞死亡（贴壁细胞漂浮）。求教原因。换液3.6ml DMEM+0.4ml新生牛血清+24μlG418传代用胰酶ph 7.2，1ml，用0.3ml新生牛血清中和，800rpm离心5min，弃上清，加入上述培养液。答：做一下G418浓度筛选，另外你的对照组未转染的细胞经同样浓度G418筛选后怎样呢？是否本来细胞状态不好？或是根本没有转进去呢？还有就是脂质
问：大家好，请问有人做过逆转录病毒包装吗，我最近在用PT67包装病毒，按照说明书上的要求，在细胞长到70%左右汇合时加入质粒和脂质体和无血清培养液培养4小时后更换为完全培养基继续培养24小时后加300μg/MLG418筛选，现在加药已经36个小时了，可是看细胞长的密密麻麻的大概有100%了吧，还不见细胞往下掉，我真是急死了，300μg/ml的筛选浓度是我在预实验里确定的应该错不了，可是为什么加药以后细胞还不死呢，说明书上说70%汇合时转染后还要继续培养24-36小时再加药，我知道这是要让抗性
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