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文献和实验旋蒸的基本原理就是减压蒸馏,在减压的条件下,连续蒸馏大量易挥发性溶剂,以达到分离和纯化的目的。 旋蒸是研发及分析实验中用于浓缩干燥回收产物的一款必备的基本仪器。即:在减压条件下,将旋转蒸发瓶置于水浴锅中,边旋转边加热,增大蒸发面积(溶剂在烧瓶内壁形成一层液体薄膜)利于瓶内溶液蒸发,样品旋转产生的作用力可以有效的抑制样品的沸腾。 影响旋转蒸发仪蒸发效率的四要素:真空度、转速、水浴温度、冷凝器 1、真空度 影响系统真空最关键且会变化的因素是:真空泵、密封圈和真空管。 密封圈:作为承接蒸发管和冷凝
蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化
抽滤 抽滤是一种直接将蛋白质转移到膜上的方法。利用真空使溶解的样品滤过膜,蛋白质吸附到膜上,同时样品中其它成分被真空抽走。另外,也可直接将样品点在膜表面使之干燥。随后可对固定在膜上的蛋白质进行分析。 点印记和狭缝印记是抽滤方法的两种变型,用多支管装置将样品加到膜上成点状或狭缝图样。这些方法可用于快速定性筛选大量样品或定量分析类似样品,尤其是测试复杂分析中实验参数的适用性。 另一
真空转移 2. 固相支持物的种类及选择: 硝酸纤维素膜:非共价结合,易脆,易丢失DNA , 尼龙膜(带正电荷的)高强度,不易破损,具有较大的DNA 结合容量,它能够吸附变性DNA ,核酸以共价结合方式不可逆的结合在尼龙膜上。尼龙膜两边均有吸附DNA 的功能,无论用哪边均可以经久耐用,可反复利用 10 次以上( 10-20 次),经毛细管(毛细吸附)作用,把DNA 从凝胶上转到膜上。DNA 转到膜上是复制胶上的带型,在 80-100 ℃真空干燥 2-4 hrs
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